Fonctionnement - StarLab StarPhoresis N2510-1010 Manuel D'utilisation

5. Pour bloquer les plaques, glisser les clamps vers
l'intérieur. Serrer les écrous. Le joint creux permet de
sceller sans trop visser. Si vous vissez trop les plaques de
verre peuvent se briser.
6. Si vous coulez et faites migrer deux gels, répéter les
étapes 4 à 6 pour le deuxième gel. Si vous ne faites
migrer qu'un gel, placer le bloque-plaque de l'autre
coté. Note : vous devez avoir deux jeux de plaques
ou un jeu de plaque et un bloque-plaque dans le
mo-dule, car ils servent de paroi à la chambre
supérieure.
7. Soulever la chambre supérieure et retourner la base de
coulage. Tourner les cames de sorte que la poignée soit
vers le haut et tirer. Placer la chambre supérieure sur les
joints. Note : un film de protection est posé sur les
joints pour le transport. Tirer sur l'adhésif pour
enlever le film.
8. Insérer les cames dans le module et tourner les
poignées d'un demi-tour pour bloquer le tout. Une fois
que l'ensemble est scellé, vous pouvez vérifier
l'étanchéité avec de l'eau : ajouter 2–3 ml d'eau et
laisser poser 2 minutes. Si vous ne voyez pas de fuite,
vider l'eau et commencer à couler le gel.
VII. FONCTIONNEMENT
Coulage du Gel
1. Nous vous recommandons de déioniser, dégazer, et filtrer vos solutions de gel d'acrylamide avant
utilisation, afin d'obtenir des résultats reproductibles et une réticulation uniforme de l'acrylamide.
Les solutions d'acrylamide doivent être stockées au froid et à l'abri de la lumière, par exemple dans
un réfrigérateur. Par contre les solutions doivent être utilisées à température ambiante. Eviter de les
mettre directement à la lumière du soleil et de la chaleur. Les conditions de polymérisation doivent
être modifiées de telle sorte qu'elle se fasse en 5 à 10 minutes. Tester un petit volume avant de
verser. Approximativement, une solution de 100ml de gel d'acrylamide dégazé à 6% sera prête en
5 minutes environ à température ambiante quand elle est mélangée avec 450μl d'ammonium
persulfate à 10% (poids/volume) fraichement préparée et 200 μl de TEMED. Il faut compter environ
10 minutes si on utilise 100 μl de TEMED et 15 minutes pour 75 μl. La quantité de catalyseur peut
être diminuée si on augmente la température.
Préparer le volume approprié de solution de gel en vous aidant du tableau B ci-contre. Ces volumes
ont été calculés à partir des données fournies par le fabricant, en enlevant le volume des spacers et
de l'entaille. Ces volumes sont approximatifs.
20 Systèmes d'électrophorèse verticale StarPhoresis
BLOQUE-
PLAQUE
PLAQUES
BASE DE COULAGE
CAMES
CHAMBRE
SUPÉRIEURE
BASE DE COULAGE