StarLab StarPhoresis N2510-1010 Manuel D'utilisation page 51

• La camera superiore potrebbe avere delle fuoriuscite: Verificate che l'assemblaggio sia dentro i perni.
Rimuovere Ia guarnizione, lavare in acqua calda per eliminare l'eccesso di sali e reinserire .
• L'intesità potrebbe essere troppo bassa: usate le condizioni di migrazione indicate in questo manuale.
Se fate migrare ad un'intensità costante, il valore indicato vale per un gel.
Problema: La migrazione è troppo rapida
• Controllate il tampone; rifatelo e provate ancora. Se il voltaggio è più basso del solito, il tampone è
probabilmente troppo diluito.
• Il voltaggio o l'intensità potrebbero essere troppo alti: diminuite il loro valore.
Problema: "Smiling"
• Il centro del gel è più caldo delle estremità: utilizzate un refrigerante o una circolazione d'acqua
fredda nella camera o diminuite il valore dell'intensità.
Problema: Vertical Streaking
• Troppi campioni o particelle nei campioni: diluire i campioni o diminuire il voltaggio. Centrifugare i
campioni per eliminare le contaminazioni.
• Il campione è precipitato: centrifugare I campioni prima di aggiungere il tampone o utilizzare una
percentuale più bassa d'acrilamide.
Problema: Le bande si estendono lateralmente
• Diffusione del campione: Assicurarsi che I campioni si siano depositati velocemente e che la corrente
venga applicata immediatamente dopo il deposito.
• Duffusione del campione durante la migrazione nel gel di concentrazione: aumentare la percentuale
del gel di migrazione o aumentare l'intensità del 25% durante la concentrazione.
• Diminuzione della forza ionica del campione: Fate corrispondere la forza ionica del campione con la
cella del gel.
Problema: le bande sono più strette dei pozzetti dei campioni
• La forza ionica dei campione è maggiore di quella delle celle del gel: togliere il sale dai campioni
o utilizzare un tampone la cui forza ionica sia la stessa di quella del gel.
Problema: I pozzetti del campione sono distorti
• I pozzettii deformati sono il risultato di una polimerizzazione incompleta: Degassare la soluzione di gel
prima del casting e aumentare la concentrazione di APS e TEMED. Il pettine può essere asciugato con
il TEMED subito prima del casting per migliorare la polimerizzazione
• La concentrazione di sale nel campione è troppo alta: Dializzare il campione o usare una colonna per
desalinizzare.
Problema: L'altezza del gel di separazione è irregolare
• Ricoprire attentamente il gel con acqua saturate nell' n-butanolo e assicurarsi che il livello del casting
sia corretto.
StarPhoresis 2-Gel Mini and Wide Mini Vertical Electrophoresis Systems
51