Analysendurchführung - StarLab StarPhoresis N2510-1010 Manuel D'utilisation

VII. ANALYSENDURCHFÜHRUNG
GIEßEN DES GELS
1. Reproduzierbarkeit und uniforme Polyacrylamid - Kettenbildung wird durch die Verwendung von
deionisiertem Wasser sowie Entgasung und Filtration der Acrylamidgel-Lösung vor dem Gebrauch
erzielt. Acrylamid-Lösungen sollten kühl und dunkel gelagert werden und vor dem Gießen auf
Raumtemperatur gebracht werden. Vermeiden Sie Hitze und Sonnenlicht.
Die Polymerisationsbedingungen sollten auf eine Polymerisationsdauer von etwa 5–10 min eingestellt
werden. Testen Sie ggfs. ein kleines Volumen in einem Probegefäß vor dem eigentlichen Gießvorgang.
Setzen Sie das benötigte Acrylamidgel-Volumen an, verwenden Sie dazu Tabelle C als Leitfaden. Die
Berechnung der Volumina basiert auf der Verwendung von Original STARLAB Glasplatten und Spacer.
Die Volumen sind lediglich Richtwerte.
TABELLE C: Gelvolumen Richtwerte
Gelvolumen,
0,8 mm Spacerdicke
Gelvolumen,
1,5 mm Spacerdicke
2. Überführen Sie die Acrylamidgel-Lösung nach dem Ansetzen in die Gelkassette, gießen Sie dabei
langsam entlang der Glasplatteninnenseite. Lufteinschlüsse in das Gel sind zu vermeiden, setzen
Sie anschließend den Kamm zwischen die Glasplatten ein.
Im Falle der Verwendung von Stapelgelen geben Sie bitte vorsichtig Gelpuffer oder mit H2O
gesättigten Butanol bis zu einer Schichtdicke von ca. 3–5 mm auf die Gellösung. Entfernen Sie nach
der Polymerisation des Trenngels die obere Flüssigkeit, spülen mit Gel-Puffer und gießen das
Sammelgel. Setzen Sie jetzt den Kamm ein, achten Sie darauf, dass keine Luftblasen an der
Kammoberfläche entstehen. Nach der Polymerisation können Sie das Gel sofort verwenden oder für
eine eventuelle spätere Verwendung in befeuchteten Papier, umhüllt mit einer Kunststofffolie, bei
4°C lagern. Die minimale Polymerisationsdauer beträgt etwa 15 min.
3. Lösen Sie die Nocken und entnehmen die Gießbasis aus der oberen Pufferkammer. Entfernen Sie
eventuelle Acrylamid-Rückstände von der Gießbasis. Setzen Sie die obere Pufferkammer (mit der
fixierten Gelkassette) in die untere Pufferkammer. An der jeweiligen linken und rechten Seite der
oberen Pufferkammer sind kleine Edelstahlköpfe angebracht, die sich in die präzisionsgefertigten
Kanäle der unteren Pufferkammer optimal einfügen.
4. Geben Sie das empfohlene Laufpuffervolumen (siehe Tabelle B) zur oberen Pufferkammer und
vergewissern Sie sich, dass der Laufpuffer 3 mm unter der oberen Kante der ungekerbten Glasplatte
liegt. Das Gel muss vollständig mit Puffer bedeckt sein. Stellen Sie sicher, dass der Laufpuffer nicht
durch undichte Stellen in die untere Pufferkammer gelangen kann. Im Falle undichter Stellen müssen
Sie den Puffer aus der Pufferkammer entfernen und die Gelkassette ordnungsgemäß justieren.
Hinweis: Verwenden Sie für den Lauf von nur einem Gel zusätzlich die mitgelieferte Blindplatte,
um ein ausgeglichenes Pufferniveau zu erhalten.
34 StarPhoresis vertikale 2-Gel Wide und Wide Mini Elektrophorese-Systeme
N2510-1010 N2516-1410
7,5 ml
15 ml
N2520-2010
13,5 ml 24,6 ml
27 ml 49,1 ml
N2520-1010
15 ml
30 ml