StarLab StarPhoresis N2510-1010 Manuel D'utilisation page 38

Problem: Banden entwickeln sich schräg
• Diffusion der Probe: Laden Sie die Proben zügig und aktivieren Sie den Strom unmittelbar nach
Probeaufgabe.
• Diffusion der Probe während des Laufes im Sammelgel: Erhöhen Sie die Sammelgel-Konzentration
oder erhöhen Sie den Strom um 25 % während des Gellaufes in der Sammelphase.
• Niedrigere Ionenstärke der Probe: Stellen Sie die Ionenstärke der Probe auf die Ionenstärke des Gels ein.
Problem: Der Bandenabstand ist geringer als der Wellabstand
• Die Ionenstärke der Probe ist höher als die des Gels. Entsalzen Sie die Probe oder verwenden Sie
Probepuffer mit der Ionenstärke des Gels.
Problem: Schlecht ausgebildete Probe-Wells
• Unvollständige Polymerisation verursacht nicht ausreichend homogene Wells. Entgasen Sie die
Gellösung vor dem Gießvorgang und erhöhen Sie die APS und TEMED Konzentration. Zur besseren
Polymerisation kann der Kamm kurz vor der Polymerisation mit TEMED benetzt werden.
• Die Salzkonzentration der Probe ist zu hoch: Dialysieren Sie die Probe oder entsalzen Sie mittels eines
Ionenaustauschers.
Problem: Das Trenngel ist am oberen Ende uneben
• Geben Sie vorsichtig etwas Wasser oder gesättigten n-Butanol auf das Gel und vergewissern Sie sich,
dass die Gießeinheit gerade steht.
Problem: Schlecht aufgelöste Banden
• Kann durch zu hohe Probemenge im Verhältnis zur Well-Breite oder Gel-Dicke verursacht werden.
Verdünnen Sie die Probe, geringere Volumina erzielen grundsätzlich höhere Auflösungen.
• Extrem hohe Spannungen führen zu schnellen Laufzeiten, jedoch geringer Auflösung. Erniedrigen Sie
die Spannung.
Problem: Ungleichmäßige äußere Lauflinien
• Einlaufen von Puffer entlang der Außenseiten/Spacer in die Geleinheit. Bewegen Sie Spacer nicht nach
der Polymerisation und vergewissern Sie sich, dass die Dichtungen fest an den Glasplatten sitzen.
Problem: Doppelte Banden - Dubletten
• Infolge von Reoxidation oder unvollständiger Reduktion der Probe: Im Falle der Verwendung von
reduzierenden Agenzien setzen Sie bitte spätestens nach 30 Tagen frischen Probepuffer an. Erhöhen
Sie die 2-Mercapto-ethanol oder Dithio-threit Konzentration in der Probe.
Problem: Weniger Banden als erwartet, mit überladenen Banden an der Farbstoffgrenze
• Verursacht durch mehrere überlappende Banden, die bis zur Farbstoffgrenze wandern. Erhöhen Sie die
Gesamt-Monomer Konzentration.
• Die Probenkonzentration hat sich durch falsche Lagerung und/oder Kontamination verringert.
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