Traitement Des Lames - Leica Kreatech FISH probes Mode D'emploi

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Sinon, vous pouvez également utiliser les protocoles suivants :

Traitement des lames :

1. Montez des coupes de tissus de 4 - 6 μm, fixées au formol et
incluses dans la paraffine (FFPE), sur des lames chargées
positivement.
2. Faites cuire les coupes tissulaires FFPE montées pendant 2 heures
à 80 °C, ou pendant 16 heures à 56 °C.
3. Retirez la paraffine des lames dans du xylène ou un substitut du
xylène, puis faites incuber pendant 2 x 10 minutes (min) à
Température Ambiante (TA).
4. Réhydratez les lames dans de l'éthanol à 100 %, 85 % et 70 %,
pendant 3 min chaque à TA. Laisser sécher à l'air à TA.
5. Placez les lames dans de l'eau (H2O) désionisée (dH2O), puis
faites incuber pendant 3 min à TA.
Continuez-en suivant le Protocole I ou le Protocole II.
Protocole I (protocole standard – si pas suffisant, utilisez le Protocole
II)
1. Préchauffez du citrate de sodium 0,01 M (pH 6,0) à 96 - 98 °C.
2. Préchauffez de l'HCl 0,01 M à 37 °C (Sauf si vous utiliser de la
pepsine « Prête à l'emploi (RtU) » (Réf. LK-101A).
3. Placez les lames dans le citrate de sodium 0,01 M (pH 6,0) à
96 - 98 °C, puis faites incuber pendant 15 min.
4. Placez les lames dans de la dH
2 min à TA.
5. Ajoutez la pepsine à l'HCl 0,01 M préchauffé pour obtenir une
concentration finale de 0 025 %. (sauf si vous utiliser de la pepsine
RtU (Réf. LK-101A).
6. Digérez les lames dans de la pepsine 0,01 M à 0,025 %, à 37 °C ou
couvrir les lames de pepsine RtU (Réf. LK-101A) à TA, puis faites
incuber pendant 5 - 45 min, (la durée dépendant de la fixation et du
type tissulaire).
O, puis faites incuber pendant
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