Agilent Technologies 1290 Infinity Manuel D'utilisation page 79

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Comment optimiser la performance de votre module
Comment obtenir la résolution la plus élevée
Dans les séparations isocratiques, l'augmentation du facteur de rétention k
donne une meilleure résolution car le soluté est conservé plus longtemps.
*
Dans les séparations du gradient, la rétention est décrite par k dans l'équa-
tion suivante :
où :
*
• k
= valeur k moyenne,
• t
= longueur de temps du gradient (ou segment du gradient) (min),
G
• F = débit (ml/min),
• V
= volume de retard de colonne,
m
• %B = changement de fraction du solvant B pendant le gradient,
• S = constant (env. 4-5 pour les petites molécules).
Ceci montre que k et donc la résolution peuvent être augmentés à l'aide d'un
gradient plus faible (un changement de 2 à 5 %/min est une ligne directrice),
un débit plus élevé et une colonne de plus petit volume. Cette équation montre
aussi comment accélérer un gradient existant : si le flux est doublé mais le
*
temps de gradient est divisé par deux, k reste constant et la séparation a l'air
semblable mais se produit dans la moitié du temps. Une recherche récemment
publiée a montré comment une colonne STM plus courte (à des températures
supérieures à 40 °C) peut générer une capacité de pic supérieure à une
colonne STM plus longue en la parcourant plus rapidement. (Consulter
Petersson et al., J.Sep.Sci, 31, 2346-2357, 2008, Maximizing peak capacity
and separation speed in liquid chromatography).
Manuel d'utilisation de la pompe quaternaire 1290 Infinity 79