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Lecteur
Le lecteur utilisé dans le système BD Viper™ LT est un ensemble intégré permettant de réaliser
une PCR en temps réel dans des micro-tubes coniques ou une SDA dans des puits C à fond plat
avec un format à 96 puits. Le lecteur intègre quatre canaux optiques permettant de lire jusqu'à
quatre colorants fluorescents dans chaque puits de réaction. Il utilise la détection par diodes DEL
d'excitation filtrées et une caméra avec filtre. La caméra est montée au-dessus des puits ou des
tubes et procède à la lecture à travers une bande d'étanchéité transparente, laquelle est appliquée
par le robot. Le système thermique inclut un bloc chauffant à température contrôlée par effet
Peltier pour exécuter les cycles thermiques ou les protocoles isothermiques et un couvercle
chauffant pour empêcher la formation de condensation sur la bande d'étanchéité.
Étalonnage de l'instrument
Le système optique du lecteur de fluorescence de l'instrument BD Viper™ LT comprend une
caméra avec filtre sélectionnable et huit DEL (diodes électroluminescentes - deux par canal
optique). La caméra est un dispositif de transfert de charge (CCD) stable ne nécessitant aucun
étalonnage ni aucune correction. L'allumage de la DEL est contrôlé par une photodiode de
contrôle située à proximité de la plaque SDA/PCR à l'aide d'une boucle de rétroaction active.
Une deuxième photodiode située à proximité de la première assure en permanence que les
DEL et les photodiodes de contrôle fonctionnent correctement. L'étalonnage du lecteur
consiste à déterminer des facteurs de correction pour chaque position de puits en raison de
l'effet parallaxe (les puits de côté apparaissent légèrement sombres). L'étalonnage est réalisé
lors de la fabrication de la machine et n'est pas susceptible d'être modifié puisque le rapport
entre la plaque et la caméra est fixe.
Figure 1-1 – Instrument BD Viper™ LT
1 – Introduction
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