Table des Matières
Publicité
1 – Introduction
1.1
Application
Le système BD Viper™ LT, utilisé conjointement avec les tests de diagnostic in vitro appropriés, est
conçu pour l'extraction automatisée des acides nucléiques provenant de plusieurs types d'échantillon,
ainsi que pour l'amplification et la détection des séquences d'acide nucléique cibles par les technologies
Strand Displacement Amplification (SDA – Amplification par déplacement de brin) ou Polymerase Chain
Reaction (PCR – Réaction en chaîne de polymérase).
1.2
Présentation
Le système BD Viper™ LT utilise soit la technologie SDA soit la technologie PCR comme méthode
d'amplification et le transfert d'énergie fluorescente (fluorescent energy transfer) comme méthode de
détection pour rechercher et mettre en évidence des pathogènes dans des échantillons cliniques sur
la base de leur matériel génétique.
Que ce soit avec les tests SDA ou PCR, les échantillons sont enregistrés et soumis à une étape de
préchauffage avec le BD Pre-warm Heater (Bloc chauffant de préchauffage). Pour les tests SDA, le
préchauffage permet de dissoudre le mucus et d'homogénéiser les échantillons. Pour les tests PCR,
l'étape de préchauffage permet également de lyser les cellules et de libérer l'ADN. Après
refroidissement, les échantillons sont chargés dans l'instrument BD Viper™ LT. L'échantillon
préchauffé est transféré dans un tube d'extraction qui contient des particules d'oxyde de fer sous
forme de film soluble. Pour les tests SDA, un pH élevé est utilisé pour lyser les cellules bactériennes et
libérer leur ADN dans la solution. L'acide est ensuite ajouté afin de faire baisser le pH et d'induire une
charge positive sur l'oxyde de fer qui, à son tour, se lie à l'ADN chargé négativement. Les particules et
l'ADN lié sont ensuite attirés sur les côtés du tube d'extraction par les aimants et la matière non liée
est aspirée vers les déchets. Les particules sont lavées et un tampon d'élution à pH élevé est ajouté
afin de récupérer l'ADN purifié. Enfin, un tampon de neutralisation est utilisé afin d'optimiser le pH de
la solution extraite en vue d'amplifier la cible.
L'instrument BD Viper™ LT transfère les échantillons extraits ainsi que les témoins des tests positifs et
négatifs vers des plaques contenant soit des micropuits d'amorçage SDA soit des tubes PCR. Pour
les tests SDA, le chauffage de chaque micropuits d'amorçage garantit une hybridation spécifique des
amorces SDA avec la cible (le cas échéant) après quoi, le mélange réactif est transféré dans le
micropuits d'amplification SDA gris correspondant. Les plaques SDA et PCR sont scellées avec une
bande d'étanchéité. Une fois la plaque scellée, la porte du lecteur intégré se referme sur la plaque.
L'amplification et la détection suivantes ont lieu. Les résultats sont rapportés automatiquement sur la
base de l'algorithme désigné par les notices des réactifs spécifiques au test.
REMARQUE
Les versions affichées du logiciel et du micrologiciel
peuvent ne pas correspondre aux versions les plus
récemment publiées. Consultez les notes de diffusion
client pour obtenir des informations précises sur les
nouvelles versions publiées.
7
Publicité
Table des Matières
