Leica BIOSYSTEMS HistoCore PELORIS 3 Manuel D'utilisation page 223

D. Retraitement direct
Avec cette méthode, la paraffine n'est pas éliminée avant le retraitement. Replacez les cassettes dans le
formol, puis sans aucun autre prétraitement, retraitez en utilisant un programme adapté à la taille et à la
nature de l'échantillon (voir
Il s'agit de la méthode la plus rapide, elle entraîne une contamination à la paraffine des réactifs. Changez
tous les réactifs (sauf la paraffine) après le retraitement direct.
7. Tissu affecté par le formol pendant le rinçage ou l'infiltration de paraffine
Ce problème peut survenir si une valve qui fuit permet au formol de s'écouler dans le bain de paraffine.
Contactez l'assistance client pour tester l'appareil si vous rencontrez ce problème.
Une contamination au formol est caractérisée par une nuance bleue dans les noyaux, la perte de détail de la
chromatine, le rétrécissement nucléaire, une éosinophilie variable et un gonflement et/ou rétrécissement
cytoplasmique.
Vous devez d'abord faire fondre les blocs, éliminer l'excès de paraffine puis placer les échantillons dans de
nouvelles cassettes. Ceci minimise la contamination à la paraffine des réactifs de traitement. Puis procédez à
un traitement inversé des blocs en suivant l'une des méthodes listées pour le problème 6. Puis, trempez
dans une solution de prélèvement à pH élevé Tris-HCl (par ex. BOND solution de prélèvement Epitope 2)
pendant 2 à 12 heures à température ambiante.
Ce traitement permet d'améliorer les qualités de coloration de HE & HES, les qualités de coupe du tissu et la
cohésion de la coupe. Le détail nucléaire, le gonflement cytoplasmique et la définition ne sont probablement
pas améliorés.
8. Tissu sous-traité fixé de manière inadéquate
Une solution possible est d'effectuer un traitement inversé lent du tissu (voir
page 196), d'appliquer une fixation au formol additionnelle, puis de retraiter en utilisant un programme
adapté à la taille et à la nature de l'échantillon (voir
Le tissu non fixé ou mal fixé est endommagé par le traitement. L'alcool et les températures élevées
produisent un effet fixateur différent de celui du formaldéhyde. Par conséquent, les blocs ont plus tendance
à se durcir et à rétrécir. S'ils sont associés à un sous-traitement, les blocs peuvent devenir inutilisables.
Protocole de nettoyage inversé rapide
Étape Type de
réactif
1 Solvant de
nettoyage
2 Éthanol de
nettoyage
Durée de traitement :
HistoCore PELORIS 3 Manuel d'utilisation Rév A09 © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2021
8.2.1 - Type d'échantillon et durée d'un
8.2.1 - Type d'échantillon et durée d'un
Durée Temp. (°C) P/V
(min)
12 65
6 55
18
protocole).
C. Processus lent inversé sur la
Agitateur
Ambiante Élevée
Ambiante Élevée
9. Dépannage
protocole).
Temps
d'égouttage
10
10
197