Utilisation d'un Programme PCR Préchargé
Plusieurs programmes PCR, préchargés dans le logiciel, peuvent être utilisés
avec le SureCycler 8800 96 puits. Ces programmes ont été conçus pour être
utilisés avec une variété d'enzymes PCR Agilent, mais aussi avec des kits qui
permettent d'amplifier l'ADN génomique ou vectoriel humain.
Chaque programme préchargé est optimisé pour amplifier les cibles d'une
longueur donnée avec une température de recuit adaptée à certains
amorceurs. Il se peut que vous deviez régler la température de recuit, le temps
d'élongation ou un autre paramètre du cycle utilisé dans le programme
préchargé pour l'adapter encore mieux à votre cible donnée. N'importe quel
programme préchargé peut être enregistré sous un autre nom, puis être
modifié afin d'optimiser le programme pour votre système amorceur/modèle.
Les programmes préchargés disponibles sont répertoriés dans le
Tableau 5 Description des programmes PCR préchargés pour le SureCycler 8800 96 puits
Nom de fichier du
programme PCR
Herculase II Fusion 1kb target.pcr
Paq5000 HS MM 1kb target.pcr
PfuTurbo HS MM 1kb target.pcr
PfuUltra II HS MM 1kb target.pcr
QuikChange II 4 kb target.pcr
QuikChange Lightning
4kb target.pcr
QuikChange Lighting Multi
4 kb target.pcr
QuikChange Multi 4kb target.pcr
Agilent SureCycler 8800 - Guide de configuration et d'utilisation
Kit ou enzyme PCR
Herculase II Fusion DNA
Polymerase
Paq5000 Hotstart Master Mix
PfuTurbo Hotstart Master Mix
PfuUltra II Hotstart Master Mix
QuikChange II Site-Directed
Mutagenesis Kit
QuikChange Lightning
Site-Directed Mutagenesis Kit
QuikChange Lightning Multi
Site-Directed Mutagenesis Kit
QuikChange Multi Site-Directed
Mutagenesis Kit
Utilisation d'un Programme PCR Préchargé
Dénaturation
Recuit
95°C pour
55°C pour
20 secondes
20 secondes
95°C pour
55°C pour
20 secondes
20 secondes
95°C pour
55°C pour
30 secondes
30 secondes
95°C pour
55°C pour
20 secondes
20 secondes
95°C pour
55°C pour
30 secondes
1 minute
95°C pour
60°C pour
20 secondes
10 secondes
95°C pour
55°C pour
20 secondes
30 secondes
95°C pour
55°C pour
1 minute
1 minute
Programmes PCR
4
Tableau
5.
Élongation
72°C pour
30 secondes
72°C pour
30 secondes
72°C pour
1 minute
72°C pour
15 secondes
68°C pour
4 minutes
68°C pour
2 minutes
65°C pour
2 minutes
65°C pour
8 minutes
51