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Utilisation du détecteur à fluorescence
Développement de méthodes
Procédure III - une seule analyse avec un couplage DAD/FLD
Les spectres UV obtenus à l'aide de détecteurs à barrette de diodes sont pres-
que identiques aux spectres d'excitation de fluorescence de la plupart des
composés organiques. Des différences spectrales découlent des caractéristi-
ques spécifiques des détecteurs, comme la résolution spectrale ou la nature
des sources lumineuses.
En pratique, la combinaison d'un détecteur à barrette de diodes et d'un dét-
ecteur à fluorescence en série permet d'obtenir l'ensemble des données néc-
essaires pour déterminer les longueurs d'onde d'excitation et d'émission
optimales pour une série de composés en une seule analyse. Le détecteur à
barrette de diodes est configuré pour acquérir des spectres UV-Visible/d'exci-
tation, et le détecteur à fluorescence, des spectres d'émission à une longueur
d'onde d'excitation fixe dans la région basse de l'UV.
Cet exemple est tiré d'une application de contrôle de la qualité des carbama-
tes. Des échantillons sont analysés pour rechercher les impuretés comme la
diamino-2,3 phénazine (DAP) et l'amino2- hydroxy-3 phénazine (AHP). Des
échantillons de référence de DAP et de AHP sont analysés avec un détecteur à
barrette de diodes et un détecteur à fluorescence.
Tableau
, page 90 montre les
spectres obtenus avec les deux détecteurs pour le DAP. Le spectre d'excitation
du DAP est très similaire au spectre d'absorption UV obtenu à l'aide du détect-
eur à barrette de diodes.
Tableau
, page 91 montre le résultat de l'application
de cette méthode à un échantillon de carbamate et à un mélange pur de DAP et
de AHP servant de référence. La colonne a été surchargée avec les carbamates
non fluorescents (méthyle benzimidazole-2 carbamate) pour rechercher les
impuretés connues, AHP et DAP.
Manuel d'utilisation du FLD Agilent 1260
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