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NOTE
L'alginate dissous se diffuse lentement. En fonction de l'alginate utilisé et de l'épaisseur de la
membrane de la capsule il peut lui falloir jusqu'à 2 heures pour quitter la capsule, en cas de quantités
substantielles. Pour maximiser le retrait du noyau :
•
Prolonger le temps d'extraction dans MOPS ou dans un milieu de culture sans ions
bivalents.
•
Cultiver les cellules dans un milieu contenant < 50 mg/l d'ions Ca.
•
Cultiver les cellules dans un milieu présentant un rapport d'ions monovalents (Na
bivalents (Ca
, Mg
2+
Recommandations spéciales pour les cellules
Pour les cellules en mitose – Dissoudre l'alginate du noyau, puis maintenir un rapport Na/Ca > 20:1
dans le milieu de culture de façon à ne pas resolidifier le noyau.
Pour les cellules au repos – il est possible de maintenir la structure du noyau d'alginate à l'état gélifié
et même d'utiliser Ba
, qui est un ion plus gélifiant que Ca
2+
et résiste à la dissolution dans une solution avec 50 mM de citrate pendant des jours.
Voir également : Gröhn P. et al. 1994. Large-scale production of Ba
Langerhans for immunoisolation. Exp. Clin. Endocrinol. 102: p.380-387.
65
) compris entre 20:1 et 50:1.
2+
6 Fonctionnement
. Le Ba-alginate est extrêmement stable
2+
alginate-coated islets of
2+
B-395 Pro Manuel d'utilisation, Version E
, K
)-ions
+
+
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