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Introduction à la chromatographie en phase liquide à ultra haute performance
Théorie de l'utilisation de particules plus fines pour la chromatographie en phase liquide
Théorie de l'utilisation de particules plus fines pour la
chromatographie en phase liquide
Introduction
En 2003, Agilent a commercialisé ses premières colonnes en silice poreuse
avec des particules de 1,8 µm. Ces colonnes étaient les premières d'une catégo-
rie de colonnes appelées par la suite les colonnes STM ou « sub-2-microniques
» (inférieures à deux microns). Ces matériaux de remplissage ont été intro-
duits dans des colonnes ZORBAX RRHT capables de résister à une pression de
600 bar lorsque le système de résolution rapide CPL Agilent série 1200 a été
lancé en 2006. En 2009, la gamme a été étendue pour inclure les colonnes
RRHD pouvant être utilisées couramment à une pression de 1200 bar lors de
la commercialisation du système CPL Agilent 1290 Infinity dont la plage de
fonctionnement comprend des pressions allant jusqu'à 1200 bar et des débits
allant jusqu'à 5 ml/min.
Ces deux colonnes à particules d'une taille sub-2-micronique (1,8 µm) peuvent
être utilisées pour atteindre deux objectifs principaux :
1 Une chromatographie plus rapide
2 Une résolution plus élevée
La pression requise pour faire avancer le solvant à travers une colonne conte-
nant des particules STM s'accroît rapidement lorsque le débit est augmenté
dans le but d'accélérer une séparation, et très rapidement lorsque la longueur
de la colonne est augmentée dans le but d'améliorer la résolution. Ainsi, le
développement de systèmes UHPLC a accompagné la commercialisation des
colonnes STM. Ces systèmes ultra-HPLC permettent d'appliquer des pressions
supérieures à 400 bar, valeur qui représentait un seuil non franchi depuis les
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Des colonnes courtes contenant des particules sub-2-microniques permet-
tent de réduire de manière dramatique la durée de l'analyse en augmentant
le débit sans toutefois perdre au niveau de la performance.
Des colonnes longues contenant des particules sub-2-microniques offrent
une meilleure efficacité et donc la résolution plus élevée nécessaire pour la
séparation d'échantillons complexes. La plus faible dispersion aboutit aussi
à l'obtention de pics d'analyte moins dilués et donc une sensibilité amélio-
rée, notamment pour les analyses CPL/MS.
Système CLP Agilent 1290 Infinity - Manuel du système et guide de référence rapide
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