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Échauffement par frottement
Faire progresser une phase mobile à travers une colonne à des pressions et
débits plus élevés génère de la chaleur. Les gradients de température ainsi
créés (radial et longitudinal) peuvent influencer l'efficacité de la colonne.
où F est le débit et p est la pression.
Des dispositifs de thermostatisation puissants (par exemple l'immersion de la
colonne dans un bain marie) génèrent un fort gradient de température radial,
ce qui conduit à une baisse signicative de l'efficacité de la colonne. La ther-
mostatisation de la colonne à l'air non ventilé réduit le gradient de températu-
re radial et donc la baisse d'efficacité, mais la température de sortie de la
colonne s'en trouve augmentée. Cette élévation de température peut avoir un
effet sur la sélectivité. À contre-pression inférieure, les pertes en performance
dues à l'échauffement par frottement sont minimisées de façon à ce que les
efficacités des colonnes sub-2-microniques de diamètre interne de 4,6 ou
3 mm restent toujours supérieures à celles des colonnes correspondantes de
diamètre interne de 2,1 mm.
Un exemple de transfert d'une méthode à gradient vers une colonne de diamè-
tre interne de 2,1 mm pour laquelle la séparation a été accélérée est présenté
dans la
lisée à un débit de 0,22 ml/min ce qui générait une pression de 380 bar pour
un réglage de la température à 37 °C ; tous les pics étaient séparés en 12,5 min
(chromatogramme non illustré). Le débit a été augmenté à 0,66 ml/min et les
temps de gradient réduits par un facteur trois ce qui générait une pression de
1020 bar ; tous les pics ont été élués en 4,2 min
Cela aurait dû permettre une séparation identique ; cependant, une perte de
résolution a été observée entre les pics 7 et 8 et entre le pic 5 et le pic princi-
pal. L'origine de cette perte de résolution était l'échauffement de la colonne
qui modifiait sa sélectivité pour ces composés. Il a été constaté qu'une ther-
mostatisation à une température de 5 °C de moins était suffisante pour com-
penser l'échauffement à l'intérieur de la colonne et restaurer la séparation
(Figure
quant également que la température à l'intérieur de la colonne était plus basse.
Système CLP Agilent 1290 Infinity - Manuel du système et guide de référence rapide
Introduction à la chromatographie en phase liquide à ultra haute performance
Figure
9, page 20. L'analyse initiale sur la colonne de 2,1 mm a été réa-
9, page 20, en bas). La pression a augmenté jusqu'à 1070 bar, indi-
Échauffement par frottement
(Figure
9, page 20, en haut).
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