Publicité
3
Optimisation du système CPL Agilent 1290 Infinity
Comment améliorer la résolution
de phases stationnaires et mobiles. Si un système de développement automati-
sé des méthodes est utilisé pour le choix des phases, il est probable que des
colonnes courtes soient utilisées pour accélérer les analyses et chaque étape
de l'exploration.
L'équation de la résolution fait apparaître que le terme le plus important est le
nombre de plateaux (ou l'efficacité) N. Il peut être optimisé de bien des façons
différentes. N est inversement proportionnel à la granulométrie et directe-
ment proportionnel à la longueur de la colonne par conséquent, les particules
les plus petites et les colonnes les plus longues donneront un nombre de pla-
teaux supérieur. La pression augmente en proportion inverse du carré de la
granulométrie et en proportion directe de la longueur de la colonne. C'est la
raison pour laquelle le système de LC 1290 Infinity a été conçu pour atteindre
1200 bar et ainsi exploiter des particules d'une granulométrie inférieure à 2
microns et les colonnes d'une longueur portée à 100 mm ou 150 mm. Il existe
même des exemples de colonnes de 100 mm et 150 mm connectées en série
pour obtenir une longueur de 250 mm . La résolution augmente comme la
racine carrée de N, donc en doublant la longueur de la colonne on augmente la
résolution d'un facteur 1,4. La viscosité de la phase mobile détermine les pos-
sibilités car elle conditionne directement la pression. Les mélanges à base de
méthanol entraînent une perte de charge plus élevée que les mélanges à base
d'acétonitrile. Au-delà de sa plus faible viscosité, l'acétonitrile est souvent
choisi parce que la forme des pics est meilleure et les pics plus étroits. En
revanche, le méthanol induit généralement une meilleure sélectivité (à coup
sûr pour les plus petites molécules de moins de 500 Da). Il est possible de
réduire la viscosité en augmentant la température, mais il faut se souvenir que
la température influence la sélectivité de la séparation. L'expérience permet
de savoir si c'est en bien ou en mal. Comme le débit et la pression sont aug-
mentés, il faut tenir compte que l'échauffement dû aux frictions à l'intérieur de
la colonne augmente et que cela peut entraîner une augmentation notable de
la dispersion et le cas échéant, un léger changement de sélectivité qui pour-
raient tous deux entraîner une perte de résolution. Cette dernière éventualité
peut être combattue en réduisant la température du thermostat de quelques
degrés. Une nouvelle analyse permettra alors de trancher.
La courbe de van Deemter indique que le débit optimal dans une colonne STM
est plus élevé pour les particules les granulométries les plus élevés. On notera
que la pente de la courbe reste faible au-delà du débit optimal. En général pour
les colonnes STM les débits utilisés proches de l'optimum sont : 2 ml/min pour
un d.i. de colonne de 4,6 mm , et 0,4 ml/min pour un d.i. de colonne de 2,1 mm
.
Système CLP Agilent 1290 Infinity - Manuel du système et guide de référence rapide
59
Publicité
