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Optimisation du système CPL Agilent 1290 Infinity
Volume de retard et volume hors colonne
Volume de retard et volume hors colonne
Le volume de retard est défini comme le volume du système entre le point de
mélange dans la pompe et au sommet de la colonne.
Le volume supplémentaire de la colonne est défini comme le volume entre le
point d'injection et le point de détection, à l'exclusion du volume dans la
colonne.
Volume de retard
Dans les séparations du gradient, ce volume entraîne un retard entre le chan-
gement de mélange dans la pompe et ce changement atteignant la colonne. Le
retard varie en fonction du débit et du volume de retard du système. En effet,
cela signifie que, dans chaque système CPL, il y a un segment isocratique sup-
plémentaire dans le profil du gradient au démarrage de chaque analyse. En
général, le profil du gradient est rapporté en termes de réglages du mélange au
niveau de la pompe, et le volume de retard n'est pas rapporté, même s'il a un
effet sur la chromatographie. Cet effet devient plus significatif à faibles débits
et faibles volumes de colonne, et il peut exercer un impact important sur la
transférabilité des méthodes de gradient. Il est par conséquent important,
pour les séparations rapides du gradient, d'avoir de faibles volumes de retard,
plus particulièrement avec des colonnes de petits diamètres (par ex. 2,1 mm
de diamètre intérieur), car elles sont souvent utilisées avec la détection spec-
trométrique de masse.
Le volume de retard d'un système comporte le volume dans la pompe depuis le
point de mélange, les connexions entre la pompe et l'échantillonneur automa-
tique, le volume du circuit via l'échantillonneur automatique, et les
connexions entre l'échantillonneur automatique et la colonne.
Par exemple, pour les méthodes CPL utilisant un matériau d'emballage de
5 µm, des débits de 1 ml/min. sont typiquement employés dans une colonne
avec un diamètre intérieur de 4,6 mm, et environ 0,2 ml/min. pour une
colonne avec un diamètre intérieur de 2,1 mm (même vélocité linéaire dans la
colonne). Sur un système ayant un volume de retard type de 1 000 µl et utili-
sant une colonne de 2,1 mm, il y aura un segment isocratique initial « caché »
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Système CLP Agilent 1290 Infinity - Manuel du système et guide de référence rapide
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