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Optimisation du système CPL Agilent 1290 Infinity
Configuration d'un volume de retard optimal
Pour des gradients très rapides d'une durée inférieure à 0,5 min, possibles uni-
quement avec les système CPL binaire Agilent 1290 Infinity, le volume de
retard du système peut être diminué facilement sans modifier physiquement
la configuration du système. Cette modification est appliquée en changeant le
comportement de l'échantillonneur automatique.
Le volume de retard de 80 µl de l'échantillonneur automatique Agilent
1290 Infinity est dû au circuit hydraulique depuis la vanne d'injection via le
dispositif doseur, l'aiguille, le siège de l'aiguille et les capillaires de connexion
qui reviennent à la vanne d'injection (voir la
Figure
18, page 35). Lors de
l'injection, la vanne passe de la voie principale à la voie de dérivation afin que
le dispositif doseur puisse aspirer l'échantillon dans le capillaire de l'aiguille.
L'injection a lieu lorsque la vanne revient sur la voie principale et l'échantillon
est purgé vers la colonne. La vanne reste dans cette position pendant l'analyse
pour que l'échantillonneur automatique soit purgé en continu ; le gradient doit
donc emprunter ce circuit (volume de retard) avant d'atteindre la colonne. Ce
volume de retard peut donc être éliminé en faisant passer la vanne d'injection
de la voie principale à la voie de dérivation juste après l'injection de l'échan-
tillon et sa purge vers la colonne. En pratique, cette opération peut être réali-
sée en quelques secondes après l'injection en activant la fonction « Réduction
automatique du volume de retard » (ADVR) dans le menu de configuration de
l'échantillonneur automatique. Le facteur de purge (généralement cinq fois le
volume d'injection) garantit que suffisamment de temps est alloué pour purger
l'échantillon de l'injecteur avant de passer sur la voie de dérivation. Cela per-
met de réduire de manière efficace le volume de retard du système de 125 µl à
50 µl.
Lors de l'activation de la fonction ADVR, il convient de noter que le gradient a
déjà démarré au niveau de la pompe au moment de l'injection. Il faut se poser
la question de savoir si le gradient a déjà atteint l'échantillonneur automati-
que, dans quel cas, un petit décalage sera observé au niveau du gradient. Cela
se produit si le volume de retard est inférieur au volume de purge et n'est pas
forcément problématique. Toutefois, il s'agit d'un phénomène qui peut être
pris en compte lors d'un transfert de méthode. Pour un facteur de purge de 5
et un volume d'injection de 10 µl, le volume qui circule à travers l'échantillon-
neur automatique avant le passage sur la voie de dérivation est de 50 µl et le
volume de retard est de 50 µl, ce qui signifie que le gradient vient juste
d'atteindre la vanne d'injection. Aucun effet ne sera constaté pour des volu-
mes d'injection plus petits, mais un petit décalage sera observé au niveau du
gradient pour des volumes d'injection plus grands. L'utilisation de la fonction
ADVR est également dépendante du débit utilisé. À un débit de 0,2 ml/min le
Système CLP Agilent 1290 Infinity - Manuel du système et guide de référence rapide
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