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Introduction à la chromatographie en phase liquide à ultra haute performance
Théorie de l'utilisation de particules plus fines pour la chromatographie en phase liquide
La séparation chromatographique peut être optimisée sur la base des caracté-
ristiques physiques de la colonne HPLC telles que la taille des particules, le
diamètre des pores, la morphologie des particules, la longueur et le diamètre
de la colonne, la vitesse du solvant et la température. De surcroît, la thermody-
namique d'une séparation chromatographique peut être prise en compte afin
de modifier les propriétés du soluté et des phases mobile et stationnaire
(pourcentage de solvant organique, force ionique, pH) pour obtenir le temps
de rétention le plus court possible et la sélectivité la plus élevée.
OPTIMISATION
DE LA CINÉTIQUE
de SÉPARATION
PHYSIQUE
Taille des particules, porosité,
dimensions de la colonne, débit,
température
Figure 3
La résolution peut être décrite dépendant de trois paramètres :
• l'efficacité ou les plateaux théoriques (N) de la colonne,
• la sélectivité (),
• le facteur de rétention (k).
D'après l'équation de la résolution
mètre ayant l'influence la plus forte sur la résolution
signifie qu'il est indispensable de choisir des propriétés de phase mobile et de
phase stationnaire ainsi qu'une température adéquates pour réussir la sépara-
tion.
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Adsorption
ou désorption lente
Isothermes non linéaires
Équilibre chimique (pH)
Sélection des conditions de HPLC optimales
Système CLP Agilent 1290 Infinity - Manuel du système et guide de référence rapide
Pression
Propriétés des phases mobile et
stationnaire, propriétés du soluté,
température
(Figure
4, page 13), la sélectivité est le para-
OPTIMISATION
DE LA
THERMODYNAMIQUE
de SÉPARATION
CHIMIE
(Figure
5, page 13). Cela
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