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Optimisation du système CPL Agilent 1290 Infinity
Comment améliorer la résolution
Comment améliorer la résolution
L'augmentation de la résolution d'une séparation améliore les données sur les
plans qualitatif et quantitatif, permet de séparer plus de pics et ouvre des
perspectives sur l'accélération de la séparation. Ce chapitre examine comment
améliorer la résolution à partir des points suivants :
• optimisation de la sélectivité ;
• remplissage avec des particules de granulométrie plus faible ;
• utilisation de colonnes plus longues ;
• utilisation de gradients moins abrupts, de débits plus élevés ;
• réduction maximale des volumes hors-colonne
• optimisation de l'injection du solvant et du volume injecté ;
• acquisition suffisamment rapide des données ;
La résolution entre deux pics est obtenue en résolvant l'équation suivante :
avec :
• R
• N = nombre de plateaux plate count (mesure de l'efficacité de la colonne) ;
• = sélectivité (entre deux pics) ;
• k
Le terme ayant la plus grande influence sur la résolution est la sélectivité, .
Dans la pratique, on agit sur ce terme en changeant le type de phase station-
naire (C18, C8, phényle, nitrile, etc.), la phase mobile et la température afin de
rechercher la sélectivité maximale entre les différents solutés à séparer. Cela
représente un travail considérable que l'on effectue au mieux à l'aide d'un sys-
tème de développement automatisé de méthodes. Un tel système permet d'éva-
luer le comportement de différentes colonnes dans toute une gamme de
conditions au moyen d'un protocole exploratoire. Ce chapitre s'intéresse à
l'obtention de la résolution la plus élevée possible pour toutes les associations
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= résolution ;
s
= facteur de rétention du second pic (paramètre autrefois dénommé fac-
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teur de capacité).
Système CLP Agilent 1290 Infinity - Manuel du système et guide de référence rapide
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