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Optimisation du détecteur
Faire correspondre la cuve à circulation à la colonne
• (++) La durée n'est pas le facteur le plus important pour des analyses haute
• Si des colonnes plus longues (> 50 mm) sont utilisées pour obtenir une
Longueur du trajet de la cuve à circulation
La loi de Lambert-Beer montre une relation linéaire entre la longueur du trajet
de la cuve à circulation et l'absorbance.
où
T
e
C [mol/l]
d [cm]
Par conséquent, les cuves à circulation avec des longueurs de trajet plus lon-
gues produisent des signaux plus élevés. Bien que le bruit augmente générale-
ment peu avec la longueur de trajet, il y a une augmentation du rapport
signal/bruit. Par exemple, dans la
moins de 10 %, mais une augmentation de 70 % de l'intensité du signal a été
observée en portant la longueur du trajet de 6 mm à 10 mm.
Quand la longueur du trajet augmente, le volume de la cuve augmente généra-
lement (dans l'exemple donné, il augmente de 5 – 14 µL. En principe, cela
entraîne une plus grande dispersion des pics. Comme illustré, cela n'a pas
affecté la résolution de la séparation du gradient de notre exemple.
En règle générale, le volume de la cuve à circulation doit être d'environ 1/3 du
volume du pic à mi-hauteur. Pour déterminer le volume de vos pics, prenez la
120
résolution. Des volumes morts plus importants sont acceptés. Nous recom-
mandons donc d'utiliser l'amortisseur et le mélangeur pour obtenir le
meilleur rapport signal / bruit.
meilleure résolution, il est préférable de choisir la cuve à circulation de
taille supérieure afin d'augmenter la sensibilité.
est la transmission, définie comme le quotient de l'intensité de la lumière I transmise
divisée par l'intensité de la lumière incidente, I
est le coefficient d'extinction, c'est-à-dire la caractéristique d'une substance donnée
pour un ensemble précisément défini de conditions de longueur d'onde, de solvant, de
température et autres paramètres,
est la concentration de l'espèce absorbante,
est la longueur de trajet de la cuve utilisée pour la mesure.
,
0
Figure
55, page 121, le bruit a augmenté de
Manuel d'utilisation des VWD Agilent Infinity 1200