Optika Italy B-510 Série Manuel D'utilisation page 93

Les objectifs de microscope conçus pour être utilisés avec de l'huile d'immersion présentent un certain nombre
d'avantages par rapport à ceux qui sont utilisés à sec. Les objectifs d'immersion sont généralement de plus
grande correction (fluorite ou apochromatique) et peuvent avoir des ouvertures numériques de travail jusqu'à
1.40 lorsqu'ils sont utilisés avec une huile d'immersion ayant la dispersion et la viscosité appropriées. Ces
objectifs permettent d'ouvrir davantage le diaphragme du condenseur de sous-étage, ce qui permet d'étendre
l'éclairage de l'échantillon et de profiter de l'ouverture numérique accrue.
Un facteur souvent négligé lors de l'utilisation d'objectifs d'immersion d'huile à ouverture numérique accrue est
la limitation du système par le condenseur de sous-étage.
Dans une situation où un objectif d'huile de NA = 1.40 est utilisé pour obtenir une image d'un échantillon avec
un condensateur de sous-étage à plus petite ouverture numérique (1,0 par exemple), l'ouverture numérique in-
férieure du condensateur l'emporte sur celle de l'objectif et la NA totale du système est limitée à 1.0, l'ouverture
numérique du condensateur.
Les condenseurs de sous-étage modernes
ont souvent un degré de correction élevé
avec des valeurs d'ouverture numériques
comprises entre 1.0 et 1.40. Afin d'utiliser effi-
cacement tous les avantages de l'immersion
dans l'huile, l'interface entre la lentille avant
du condensateur de sous-étage et la face in-
férieure de la lame du microscope contenant
l'échantillon doit également être immergée
dans l'huile.
Un système idéal est schématisé à la Fig. 21,
où de l'huile d'immersion a été placée aux in-
terfaces entre la lentille frontale de l'objectif
et la lame d'échantillon et aussi entre la len-
tille frontale du condenseur et la face infé-
rieure de la lame d'échantillon.
Ce système a été qualifié de Système
d'Immersion Homogène et c'est la situation
idéale pour obtenir une ouverture numérique
et une résolution maximale dans un micro-
scope optique.
Dans ce cas, l'indice de réfraction et la dis-
persion de la lentille frontale de l'objectif, de
l'huile à immersion, de la lentille frontale du condenseur de sous-étage et du milieu de montage sont égaux ou
très proches.
Dans ce système idéal, un rayon lumineux oblique peut passer à travers la lentille du condensateur et com-
plètement à travers la lame du microscope, l'huile d'immersion et le milieu de montage sans être dévié par
réfraction aux interfaces verre-huile ou verre moyen de montage.
Lors de l'utilisation d'objectifs d'immersion d'huile achromat de haute puissance, il est parfois permis d'omettre
l'étape d'huilage de la lentille supérieure du condenseur.
En effet, le diaphragme d'ouverture du condenseur doit souvent être réduit avec des objectifs moins corrigés
pour éliminer les artefacts et fournir une image optimale.
La réduction de la taille du diaphragme réduit l'augmentation potentielle de l'ouverture numérique (fournie par
l'huilage de la lentille du condenseur), de sorte que la perte de qualité d'image dans ces conditions est géné-
ralement négligeable.
La microscopie fond noir est une technique d'éclairage spécialisée qui utilise l'éclairage oblique pour amélio-
rer le contraste dans des échantillons qui ne peuvent pas être bien observés dans des conditions normales
d'éclairage en fond clair.
Nous connaissons tous très bien l'apparence et la visibilité des étoiles par une nuit sombre, malgré leurs dis-
tances énormes par rapport à la Terre. Les étoiles peuvent être vues en raison du fort contraste entre leur faible
luminosité et le ciel noir.
Lentille frontale
Objectif
Lamelle
Échantillon
Lentille frontale
Condenseur
Système d'immersion
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Huile
d'immersion
Huile
d'immersion
homogène
Moyen de
montage
Fig. 21