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Optika Italy B-380 Manuel D'utilisation

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Phase contrast
Version:
2
Issued:
18, 08, 2014
INSTRUCTION MANUAL
Model
B-380
B-500
B-800
B-1000

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Manuels Connexes pour Optika Italy B-380

Sommaire des Matières pour Optika Italy B-380

  • Page 1 Phase contrast INSTRUCTION MANUAL Model B-380 B-500 B-800 B-1000 Version: Issued: 18, 08, 2014...
  • Page 2 Table of Contents Introduction to phase contrast Setup on B-380 microscopes Setup on B-500 B-800 B-1000 microscopes Page 2...
  • Page 3 Introduction to phase contrast Unstained specimens that do not absorb light are called phase objects because they slightly alter the phase of the light diffracted by the specimen, usually by retarding such light approximately 1/4 wavelength as compared to the undeviated direct light passing through or around the specimen unaffected. Unfortunately, our eyes as well as camera film, are unable to detect these phase differences.
  • Page 4 Amplitude objects show excellent contrast when the diffracted and direct light are out of step (display a phase difference) by 1/2 of a wavelength. Zernike’s method was to speed up the direct light by 1/4 wavelength so that the difference in wavelength between the direct and deviated light for a phase specimen would now be 1/2 wavelength.
  • Page 5 Setup on B-380 microscopes In order to use phase contrast on a B-380 series microscope, follow these steps: • Make sure that a phase contrast objectives set is mounted on the nosepiece (phase contrast objectives are marked with “PH” writing).
  • Page 6 • Fully insert the phase contrast condenser into the holder, pushing it until it is well inserted: • Rotate the condenser annuli disc to the “0” position (brightfield). • Completely open the aperture diaphragm: Completely open this diaphragm • Turn on the light and put a sample slide on the stage (an opaque specimen will make alignment easier). •...
  • Page 7 • Take one of the eyepieces out of the tube, and insert the centering telescope. Rotate its upper part in order to view a sharp image of the phase ring: Centering telescope Adjustable upper part • Typically, you have to see a pair of rings: one brighter and one darker. The bright one is the image of the an- nulus on the condenser, while the dark one is the phase ring inside the objective: Image as seen in the telescope •...
  • Page 8 • The goal is to superimpose this bright ring to the dark one, so that they are in the same position: Image as seen in the telescope, with centred rings. • Reinsert the eyepiece. Now you can look at the phase contrast image of your sample. The same procedure must be followed to align the other objectives (20x, 40x or 100x).
  • Page 9 Setup on B-500 B-800 B-1000 microscopes In order to use phase contrast on a B-500, B-800 or B-1000 series microscope, follow these steps: • Make sure that a phase contrast objectives set is mounted on the nosepiece (phase contrast objectives are marked with “PH”...
  • Page 10 • Fully insert the phase contrast condenser into the holder, pushing it until it is well inserted: Condenser must fully enter into its guide • Rotate the condenser annuli disc to the “BF” position (brightfield). • Completely open the aperture diaphragm: •...
  • Page 11 • Take one of the eyepieces out of the tube, and insert the centering telescope. Loosen the screw of the tele- scope and move its upper part in order to view a sharp image of the phase ring, then lock the screw: Telescope’s screw Adjustable upper part •...
  • Page 12 • The goal is to superimpose this bright ring to the dark one, so that they are in the same position: Image as seen in the telescope, with centred rings. • Release the centering screws slowly, guiding them to the rest position. •...
  • Page 13 Contrasto di fase MANUALE D’ISTRUZIONI Modello B-380 B-500 B-800 B-1000 Versione: 2 Emesso il: 18, 08, 2014...
  • Page 14 Indice Contenuti Introduzione al contrasto di fase Set-up su microscopi B-380 Set-up sui microscopi B-500 B-800 B-1000 Pagina 14...
  • Page 15 Introduzione al contrasto di fase I preparati senza alcuna colorazione che non assorbono luce sono chiamati “oggetti di fase”, poiché alterano leggermente la fase della luce che li attraversa, ritardandola tipicamente di 1/4 di lunghezza d’onda rispetto alla luce diretta che passa non deviata intorno al campione. Sfortunatamente i nostri occhi, come i sensori delle te- lecamere, non sono in grado di apprezzare queste differenze di fase.
  • Page 16 Il campione mostra un eccellente contrasto quando la luce diffratta e la luce diretta (non deviata) sono sfasate di 1/2 di lunghezza d’onda. Il metodo di Zernike consiste nello sfasare ulteriormente anche la luce diretta di 1/4 di lunghezza d’onda, in modo che la differenza tra luce diffratta e diretta sia proprio 1/2 di lunghezza d’onda. Come risultato, le due componenti di luce producono un’interferenza distruttiva sul piano immagine dell’oculare.
  • Page 17 Set-up su microscopi B-380 Per utilizzare il contrasto di fase sulla serie B-380, seguire questi passi: • Assicurarsi di aver montato sul revolver un set di obiettivi a contrasto di fase (sono marcati con “PH” sul corpo). • Abbassare il condensatore usando l’apposita manopola:...
  • Page 18 • Inserire completamente il condensatore per contrasto di fase nel proprio supporto, spingendolo a fine corsa: • Ruotare la ghiera del condensatore fino alla posizione “0” (campo chiaro). • Aprire completamente il diaframma di apertura: Aprire completamente questo diaframma • Accendere l’illuminazione e porre un campione sul tavolino (un campione opaco faciliterà...
  • Page 19 • Estrarre uno dei due oculari dalla testa, e inserire il telescopio di centratura. Ruotare la parte superiore fino a mettere a fuoco l’immagine degli anelli di fase: Telescopio di centratura Parte superiore regolabile • Tipicamente saranno visibili due anelli: uno più chiaro ed uno più scuro. Quello chiaro è l’immagine del dia- framma ad anello del condensatore, mentre l’anello scuro rappresenta l’anello di fase dentro l’obiettivo: Immagine vista nel telescopio •...
  • Page 20 Immagine vista nel telescopio, con gli anelli centrati • Reinserire l’oculare Ora è possibile visualizzare l’immagine a contrasto di fase del campione. La stessa procedura va seguita per allineare gli altri obiettivi (20x, 40x, 100x). Notare che per ottenere una corretta immagine con l’obiettivo 100x, deve essere usato dell’olio da immersione (posto tra obiettivo e vetrino copri-oggetto).
  • Page 21 Set-up sui microscopi B-500 B-800 B-1000 Per utilizzare il contrasto di fase sulla serie B-500, B-800 e B-1000, seguire questi passi: • Assicurarsi di aver montato sul revolver un set di obiettivi a contrasto di fase (sono marcati con “PH” sul corpo).
  • Page 22 • Inserire completamente il condensatore per contrasto di fase nel proprio supporto, spingendolo a fine corsa: Il condensatore deve entrare completamente nella guida • Ruotare la ghiera del condensatore fino alla posizione “BF”. • Aprire completamente il diaframma di apertura: •...
  • Page 23 • Estrarre uno dei due oculari dalla testa, e inserire il telescopio di centratura. Allentare la vite del telescopio e muovere la parte superiore fino a mettere a fuoco l’immagine degli anelli di fase, quindi riserrare la vite: Vite del telescopio Parte superiore regolabile •...
  • Page 24 • Lo scopo è sovrapporre l’anello chiaro a quello scuro, in modo che siano nella medesima posizione: Immagine vista nel telescopio, con gli anelli centrati • Rilasciare lentamente le viti di centraggio, accompagnandole alla posizione di riposo. • Reinserire l’oculare. Ora è...
  • Page 27 Contraste de fases MANUAL DE INSTRUCCIONES Modelo B-380 B-500 B-800 B-1000 Versión: Publicado: 18, 08, 2014...
  • Page 28 Indice Introducción al contraste de fases Instalación sobre microscopio B-380 Instalación sobre microscopios B-500 B-800 B-1000 Página 28...
  • Page 29 Introducción al contraste de fases Las preparaciones sin teñir y por lo tanto transparentes que no absorben la luz se llama “muestras de fases”, ya que alteran ligeramente la luz que pasa a través de ellos, por lo general el contraste de fases retarda 1/4 de longitud de onda con respecto a la luz directa y sin desvío, que pasa a través de una muestra teñida.
  • Page 30 El ejemplo muestra un excelente contraste cuando la luz difractada y la luz directa (no desviada) están retar- dadas 1/2 longitud de onda. El método de fases Zernike consiste en acelerar la luz directa 1/4 de longitud de onda, por lo que la diferencia de onda entre la luz directe y la luz difractada de una muestra transparente es precisamente 1/2 longitud de onda.
  • Page 31 Instalación sobre microscopio B-380 Para instalar el kit de contraste de fases, por favor siga éstas instrucciones: • Asegúrese de que ha montado en el revólver los objetivos de contraste de fase (marcados con una “PH” en la parte externa).
  • Page 32 • Insertar el condensador de contraste de fases en el soporte empujándo hasta su tope para asegurarse que está bien sujeto. • Girar los anillos del condensador hasta la posición “0” (campo claro). • Abrir completamente la apertura del diafragma. abrir completamente éste diafragma •...
  • Page 33 • Quitar uno de los oculares en inserar el ocular telescópico de fases en su lugar. Girar hacia arriba o abajo con el fin de ver una imagen nítida del anillo de fase. Ocular telescópico Parte móvil del ocular telescópico •...
  • Page 34 • Debe conseguir superponer el anillo brillante sobre el oscuro, de modo que ambos queden en la misma posición. Imagen tal y como aparece en el ocular telescópico después de centrar los anillos • Vuelva a colocar el ocular que había extraído anteriormente. Ahora su microscopio puede trabajar con la técnica de contraste de fases para muestras transparentes.
  • Page 35 Instalación sobre microscopios B-500 B-800 B-1000 Para instalar el kit de contraste de fases, por favor siga éstas instrucciones: • Asegúrese de que ha montado en el revólver los objetivos de contraste de fase (marcados con una “PH” en la parte externa). •...
  • Page 36 • Insertar el condensador de contraste de fases en el soporte empujándo hasta su tope para asegurarse que está bien sujeto. Condensador debe coincidir de lleno en la guía • Girar los anillos del condensador hasta la posición “BF” (campo claro). •...
  • Page 37 • Quitar uno de los oculares en inserar el ocular telescópico de fases en su lugar. Aflojar el tornillo del ocular de fases y mover hacia arriba o abajo con el fin de ver una imagen nítida del anillo de fase, ahora puede apretar el tornillo.
  • Page 38 • Debe conseguir superponer el anillo brillante sobre el oscuro, de modo que ambos queden en la misma posición. Imagen tal y como aparece en el ocular telescópico después de centrar los anillos • Suelte los tornillos de centrado lentamente, hasta la posición de reposo. •...
  • Page 41 Contrasto di fase MANUEL D’UTILISATION Modèle B-380 B-500 B-800 B-1000 Version: 18, 08, 2014...
  • Page 42 Indice Contenuti Introduction au contraste de phase Installation sur les microscopes de la série B-380 Installation sur les microscopes de la série B-500, B-800 et B-1000 Page 42...
  • Page 43 Introduction au contraste de phase Les échantillons non colorés qui n’absorbent pas la lumière sont appelés objets de phase, car ils modifient légè- rement la phase de la lumière diffractée par l’échantillon, généralement en retardant cette lumière d’environ 1/4 de longueur d’onde par rapport à la lumière directe non déviée passant à travers ou autour de l’échantillon non affecté.
  • Page 44 Les objets d’amplitude présentent un excellent contraste quand la lumière diffractée et directe sont hors phase d’1/2 de longueur d’onde. La méthode de Zernike était celle d’accélérer la lumière directe d’ 1/4 de longueur d’onde pour que la différence de longueur d’onde entre lumière directe et lumière déviée d’un échantillon de phase soit de 1/2 de longueur d’onde.
  • Page 45 Installation sur les microscopes de la série B-380 Pour utiliser le contraste de phase sur un microscope de la série B-380, procédez comme suit: • Assurez-vous que le jeu d’objectifs pour contraste de phase est monté sur le revolver (les objectifs à contraste de phase portent l’indication «PH»)
  • Page 46 • Insérez complètement le condenseur pour contraste de phase dans le logement approprié en le poussant jusqu’à ce qu’il soit bien inséré. • Tourner le disque du condenseur jusqu’à ce qu’il soit en posistion ‘’BF’’ (fond clair). • Ouvrir complètement le diaphragme d’ouverture: Ouvrir complètement ce diaphragme •...
  • Page 47 • Enlever l’un des deux oculaires du tube, et insérer le télescope de centrage. Tourner sa partie supérieure pour visualiser une image nette de l’anneau de phase: Télescope de centrage Partie supérieure réglable • Généralement, on voit une paire d’anneaux: un plus lumineux et un plus foncée. Le plus lumineux est l’image de l’anneau sur le condenseur, tandis que le plus foncé...
  • Page 48 • Le but est de superposer cet anneau lumineux sur l’anneau foncé, de façon à ce qu’ils soient dans la même position: L’image vue dans le télescope, avec des anneaux centrées. • Réinsérer l’oculaire. Maintenant, vous pouvez regarder l’image en contraste de phase de votre échantillon. La même procédure doit être suivie pour aligner les autres objectifs (20x, 40x ou 100x).
  • Page 49 Installation sur les microscopes de la série B-500, B-800 et B-1000 Afin de pouvoir utiliser le contraste de phase sur un microscope B-500, B-600 ou B-1000 , procédez comme suit: • Assurez-vous que le jeu d’objectifs pour contraste de phase est monté sur le revolver (les objectifs à contraste de phase sont marqués avec l’écriture «PH») •...
  • Page 50 • Insérer complètement le condenseur pour contraste de phase dans le logement approprié, en le poussant jusqu’à ce qu’il soit bien inséré Le condenseur doit entrer complètement dans son logement • Tourner le disque du condenseur jusqu’à ce qu’il soit en posistion ‘’BF’’ (fond clair). •...
  • Page 51 • Enlever l’un des deux oculaires du tube et insérer le télescope de centrage. Desserrer la vis du télescope et déplacer sa partie supérieure afin de visualiser une image nette de l’anneau de phase, ensuite bloquer la vis: Vis du télescope Partie supérieure réglable •...
  • Page 52 • Le but est de superposer cet anneau lumineux à l’anneau foncé, de façon à ce quils soient dans la même position: Immagine vista nel telescopio, con gli anelli centrati • Desserrer les vis de centrage lentement, en les guidant à la position de repos.. •...
  • Page 53 Contraste de fase MANUAL DE INSTRUÇÕES Modelo B-380 B-500 B-800 B-1000 Versão: Emitido em: 18, 08, 2014...
  • Page 54 Índice de Conteúdos Introdução ao contraste de fase Configuração em microscópios B-380 Configuração em microscópios B-500 B-800 B-1000 Page 54...
  • Page 55 Introdução ao contraste de fase Os preparados sem nenhuma cor que não absorvem luz são chamados de “objetos de fase” pois alteram ligei- ramente a fase da luz que os atravessa, atrasando-a tipicamente em 1/4 do comprimento da onda em relação à...
  • Page 56 A amostra demonstra um excelente contraste quando a luz difratada e a luz direta (não desviada) estão defa- sadas em 1/2 de comprimento de onda. O método de Zernike consiste no defasar adicionalmente também a luz direta de 1/4 de comprimento de onda, de modo que a diferença entre luz difratada e direta seja de 1/2 de comprimento de onda.
  • Page 57 Configuração em microscópios B-380 Para utilizar o contraste de fase na série B-380, fazer o seguinte: • Certificar-se de ter montado no revólver um conjunto de objetivas de contraste de fase (são marcadas com “PH” no corpo). • Baixar o condensador usando o manípulo específico:...
  • Page 58 • Inserir completamente o condensador para contraste de fase no seu suporte, empurrando até ao fim do curso: • Rodar a braçadeira do condensador até à posição “0” (campo claro). • Abrir completamente o diafragma de abertura: Abrir completamente este diafragma •...
  • Page 59 • Extrair um dos dois oculares da cabeça e inserir o telescópio de centragem. Rodar a parte superior até focar a imagem dos anéis de fase: Telescópio de centragem Parte superior regulável • Normalmente serão visíveis dois anéis: um mais claro e um mais escuro. Aquele claro é a imagem do dia- fragma a anel do condensador, enquanto que o anel escuro representa o anel de fase dentro da objetiva: Imagem vista no telescópio •...
  • Page 60 • O objetivo é sobrepor o anel claro ao anel escuro, de modo que estejam na mesma posição: Imagem vista no telescópio, com os anéis centrados • Reinserir o óculo Agora é possível ver a imagem em contraste de fase da amostra. O mesmo procedimento deve ser seguido para alinhar as outras objetivas (20x, 40x, 100x).
  • Page 61 Configuração em microscópios B-500 B-800 B-1000 Para utilizar o contraste de fase na série B-500, B-800 e B-1000, fazer do seguinte modo: • Certificar-se de ter montado no revólver um conjunto de objetivas de contraste de fase (são marcadas com “PH”...
  • Page 62 • Inserir completamente o condensador para contraste de fase no seu suporte, empurrando até ao fim do curso: O condensador deve entrar completamente na guia • Rodar a braçadeira do condensador até à posição “BF”. • Abrir completamente o diafragma de abertura: •...
  • Page 63 • Extrair um dos dois oculares da cabeça e inserir o telescópio de centragem. Liberar o parafuso do telescópio e mover a parte superior até focar a imagem dos anéis de fase, em seguida apertar o parafuso: Parafuso do telescópio Parte superior regulável •...
  • Page 64 • O objectivo é o de se sobrepor a luz anel de escuro, a fim de que eles se encontram na mesma posição: Imagem vista em telescópio, com os anéis centrada • Lentamente, solte os parafusos de centralização, acompanhando-os para a posição de repouso. •...
  • Page 65 Page 65...
  • Page 67 Phasenkontrast ANLEITUNG Modell B-380 B-500 B-800 B-1000 Version: Ausgestellt am: 18, 08, 2014...
  • Page 68 Inhaltsangabe Einführung zum Phasenkontrast Set-up Mikroskope B-380 Set-up Mikroskope B-500 B-800 B-1000 Pagina 68...
  • Page 69 Einführung zum Phasenkontrast Präparate ohne irgendeine Färbung, die kein Licht absorbieren werden als “Phasenobjekte” bezeichnet, weil sie die Phase des sie durchlaufenden Lichtes leicht verändern, und es im Vergleich zum direkten Licht, das die Probe nicht abgelenkt durchläuft, um eine viertel Wellenlänge verschieben. Unglücklicherweise sind unsere Augen, genau wie die Sensoren der Kameras, nicht in der Lage diese Phasenunterschiede abzuschätzen.
  • Page 70 Die Probe weist einen exzellenten Kontrast auf, wenn das gebeugte Licht und das direkte (nicht abgelenkte) Licht um eine halbe Wellenlänge verschoben sind. Die Methode von Zernike besteht darin, auch das direkte Licht weiterhin um eine viertel Wellenlänge zu verschieben, damit der Unterschied zwischen gebeugtem und direktem Licht genau einer halben Wellenlänge entspricht.
  • Page 71 Set-up Mikroskope B-380 Um den Phasenkontrast für Serie B-380 zu benutzen, folgende Schritte befolgen: • Sicherstellen, dass am Revolver eine Satz Phasenkontrast-Objektive angebracht ist (am Körper mit “PH” gekennzeichnet). • Kondensor mithilfe des entsprechenden Griffs senken: Höheneinstellung des Kondensors •...
  • Page 72 • Phasenkontrast-Kondensor vollständig in seiner Halterung einsetzen, indem er bis zum Endanschlag ge- drückt wird: • Kondensor-Ring bis zur Position “0” (Hellfeld) drehen. • Aperturblende komplett öffnen: Diese Blende vollständig öffnen • Beleuchtung einschalten und eine Probe auf den Tisch legen (eine dunkle Probe erleichtert die Zentrierung). •...
  • Page 73 • Einen der beiden Okulare aus dem Tubus ziehen und das Einstellteleskop einsetzen. Den oberen Teil so lange drehen, bis das Bild der Phasenringe scharf gestellt ist: Einstellteleskop Oberer Teil einstellbar • Typischerweise sind zwei Ringe sichtbar, ein hellerer und ein dunklerer. Der hellere ist das Bild der Konden- sor-Ringblende, während der dunkle Ring den Phasenring im Objektiv repräsentiert: Im Teleskop gesehenes Bild •...
  • Page 74 • Der Zweck besteht darin, den hellen Ring mit dem dunklen Ring zu überlagern, damit sie deckungsgleich sind: Im Teleskop gesehenes Bild, bei zentrierten Ringen • Okular wieder einsetzen Jetzt kann das Phasenkontrastbild der Probe dargestellt werden. Für die Zentrierung der anderen Objektive (20x, 40x, 100x) auf dieselbe Weise vorgehen. Um mit dem 10x Objektiv ein korrektes Bild zu erhalten, muss Immersions-Öl (zwischen Objektiv und Objektträger-Abdeckglas) benutzt werden.
  • Page 75 Set-up Mikroskope B-500 B-800 B-1000 Um den Phasenkontrast für Serie B-500, B-800 und B-100 zu benutzen, folgende Schritte befolgen: • Sicherstellen, dass am Revolver ein Satz Phasenkontrast-Objektive angebracht ist (am Körper mit “PH” gekennzeichnet). • Kondensor mithilfe des entsprechenden Griffs senken: Höheneinstellung des Kondensors •...
  • Page 76 • Phasenkontrast-Kondensor vollständig in seiner Halterung einsetzen, indem er bis zum Hubende gedrückt wird: Der Kondensor muss vollständig in die Führung eingesetzt werden • Kondensor-Ring bis zur Position “BF” drehen. • Aperturblende komplett öffnen: • Beleuchtung einschalten und eine Probe auf den Tisch legen (eine dunkle Probe erleichtert die Zentrierung). •...
  • Page 77 • Eines der beiden Okulare aus dem Tubus ziehen und das Einstellteleskop einsetzen. Die Teleskop-Schraube lockern und den oberen Teil so lange bewegen, bis das Bild der Phasenringe scharf gestellt ist, die Schraube anschließend wieder anziehen: Teleskop-Schraube Oberer Teil einstellbar •...
  • Page 78 • Der Zweck besteht darin, den hellen Ring mit dem dunklen Ring zu überlagern, damit sie deckungsgleich sind: Im Teleskop gesehenes Bild, bei zentrierten Ringen • Langsam lassen Sie die Zentrierung Schrauben, Begleit in die Ruheposition. • Okular wieder einsetzen. Jetzt kann das Phasenkontrastbild der Probe dargestellt werden.
  • Page 80 Headquarters and Manufacturing Facilities OPTIKA S.r.l. ® Via Rigla, 30 - 24010 Ponteranica (BG) - ITALIA Tel.: +39 035.571.392 - Fax: +39 035.571.435 info@optikamicroscopes.com - www.optikamicroscopes.com Optika Sales branches OPTIKA Spain ® spain@optikamicroscopes.com OPTIKA USA ® usa@optikamicroscopes.com OPTIKA China ® china@optikamicroscopes.com OPTIKA Hungary hungary@optikamicroscopes.com...

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