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C. Processus lent inversé
Processus utilisant un protocole de nettoyage modifié durant une période égale au temps requis pour continuer le
traitement du tissu
un programme adapté à la taille et à la nature de l'échantillon
protocole)
Un processus lent inversé est très favorable pour le tissu. Si le temps le permet, il s'agit de la meilleure option.
7. Tissu affecté par le formol pendant le rinçage ou l'infiltration de paraffine
Ce problème peut survenir si une valve qui fuit permet au formol de s'écouler dans le bain de paraffine. Contactez
l'assistance client pour tester l'appareil si vous rencontrez ce problème.
Une contamination au formol est caractérisée par une nuance bleue dans les noyaux, la perte de détail de la
chromatine, le rétrécissement nucléaire, une éosinophilie variable et un gonflement et/ou un rétrécissement
cytoplasmique.
Vous devez d'abord faire fondre les blocs, éliminer l'excès de paraffine puis placer les échantillons dans de
nouvelles cassettes. Ceci minimise la contamination à la paraffine des réactifs de traitement. Ensuite, retraitez
les blocs avec l'une des méthodes indiquées pour le problème 6. Puis, trempez dans une solution de prélèvement
à pH élevé Tris-HCl (par ex. Leica BOND solution de récupération d'épitopes 2) pendant 2 à 12 heures à température
ambiante.
Ce traitement permet d'améliorer les qualités des colorations à l'hématoxyline et l'éosine, les qualités de coupe
du tissu et la cohésion de la coupe. Le détail nucléaire, le gonflement cytoplasmique et la définition ne sont
probablement pas améliorés.
8. Tissu sous-traité fixé de manière inadéquate
Une solution possible est d'effectuer un traitement inversé lent du tissu (→ p. 183 – C. Processus lent inversé),
d'appliquer une fixation au formol additionnelle, puis de retraiter en utilisant un programme adapté à la taille et à la
nature de l'échantillon (→ p. 162 – 10.2.1 Type d'échantillon et durée d'un protocole).
Le tissu non fixé ou mal fixé est endommagé par le traitement. L'éthanol et les températures élevées produisent
un effet fixateur différent de celui du formaldéhyde. Par conséquent, les blocs ont plus tendance à se durcir et à
rétrécir. S'ils sont associés à un sous-traitement, les blocs peuvent devenir inutilisables.
Protocole de nettoyage inversé rapide
Étape
Type de réactif
1
Solvants de nettoyage
2
Éthanol de nettoyage
Durée de traitement :
HistoCore PEGASUS Plus
(→ p. 184 – Protocole de nettoyage inversé lent)
Durée (min)
Retraitez ensuite avec du formol en utilisant
(→ p. 162 – 10.2.1 Type d'échantillon et durée d'un
Temp.(°C)
P/V
Ambiante
12
65
6
55
Ambiante
18
Solution
Agitateur
Temps
d'égouttage
Marche
10
Marche
10
11
183
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