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7 Dépannage
7.2 Dépannage d'électrotransfert
Problème
Paramètres des membranes
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Solution
Vérifier la quantité optimale de méthanol
requise pour le type de membrane, puis la solu-
tion tampon. Ajouter du méthanol à 10 % à 20 %
au tampon de transfert pour améliorer la liaison
avec la nitrocellulose.
Porter des gants lors de la manipulation des
membranes.
Stocker les membranes à température ambiante
et à l'écart de la lumière directe du soleil pour les
maintenir activées.
Utiliser une membrane présentant une taille de
pore inférieure (0.10 à 0.20 µm) si les protéines
passent à travers la membrane, ou utiliser un
autre type de membrane.
Placer une membrane à la fois sur et sous le gel si
vous pensez qu'une (1) protéine se déplace dans
la direction opposée à celle de la plupart des
protéines. Rechercher la présence de protéines
sur les deux membranes.
Vérifier si la quantité d'échantillon pour la
surface de liaison est excessive en appliquant
deux membranes au lieu d'une. En cas de
« passage », réduire la quantité d'échantillon.
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