Table des Matières
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8.3
Hybridation et lavage
8.3.1
Préparation et mise en place
L'hybridation doit être effectuée à température ambiante (18-25 °C). Commencer les préparations
nécessaires pour les étapes d'hybridation et de lavage au moins 30 minutes avant de débuter la
procédure d'hybridation.
Pour dissoudre les éventuels précipités qui se sont formés dans les tampons d'hybridation et
¯
de lavage, exposer ceux-ci à la température ambiante (18-25 °C) pendant 30 minutes et bien
mélanger avant utilisation.
Le stockage du kit de test PelvoCheck
dans le tampon d'hybridation et le tampon B. Laisser les solutions s'équilibrer à température ambiante
(18-25 °C), puis passer le tube au vortex ou agiter le flacon jusqu'à dissolution du précipité.
Préparer la chambre d'hybridation oCheck
¯
dans la chambre d'hybridation et fermer le couvercle pour créer une atmosphère saturée en
humidité.
Pour éviter l'évaporation du faible volume de mélange d'hybridation qui se trouve sur la puce, il
est nécessaire de réaliser l'hybridation dans une atmosphère saturée en humidité. Une chambre
d'hybridation dédiée à l'analyse PelvoCheck
le chapitre 2).
Incuber la quantité requise de puces PelvoCheck
¯
préparée à température ambiante (18-25 °C) pendant au moins 10 minutes.
!
Le porte-lame magnétique de la chambre d'hybridation est équipé d'un aimant à l'une de ses deux extrémités
seulement. Si moins de quatre puces PelvoCheck
à remplir le porte-lame avec les puces PelvoCheck
PelvoCheck
CT/NG ne seront pas recouvertes de liquide au cours de la procédure de lavage.
®
Conserver les puces PelvoCheck
sera conservée dans la pochette en plastique fermée avec le sachet de dessicatif et mise à l'abri de la lumière.
¯
Préparer les solutions de lavage I et II conformément aux instructions suivantes.
¯
Préparation des solutions de lavage I et II :
Préparer le mélange des solutions de lavage I et II en fonction du nombre de puces PelvoCheck
¯
CT/NG analysées, comme indiqué dans le Tableau 3 (voir page 29).
Aliquoter deux volumes égaux du mélange de solution de lavage dans deux chambres de lavage
¯
oCheck
distinctes, et les étiqueter en tant que solutions de lavage I et II. Chaque chambre
®
de lavage oCheck
®
nécessaire pour 4 puces au maximum. Utiliser cette échelle pour contrôler la quantité de tampon.
Préchauffer la solution de lavage II à 50 °C dans un bain-marie à température contrôlée pendant
¯
au moins 20 minutes avant l'utilisation. S'assurer que le niveau de remplissage du bain-marie est
égal à celui de la solution de lavage II.
PelvoCheck
CT/NG - Mode d'emploi
®
Révision : BQ-029-03 / Décembre 2014
CT/NG entre 4 et 8 °C peut entraîner la précipitation de sels
®
®
CT/NG est disponible auprès de Greiner Bio-One (voir
®
CT/NG non utilisées dans la boîte à lames du PelvoCheck
®
contient une échelle gravée qui indique la quantité de solution de lavage
: Placer une serviette en papier neuve et humide
CT/NG dans la chambre d'hybridation
®
CT/NG doivent être hybridées simultanément, veiller
®
CT/NG du côté opposé à l'aimant. Sinon, les puces
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CT/NG qui
®
®
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