•
N'utilisez pas l'option Load Ahead (Pré-charge) ou Loop Offline
(Boucle hors ligne) si vous dépannez des problèmes de contamination
inter-échantillons.
•
Lors de l'installation ou du démontage d'une colonne, maintenez
toujours en place le raccord de compression réutilisable du préchauffeur
actif. Faites tourner la colonne ou le filtre intégré en option pour
installer ou démonter la colonne.
Dispersion
La dispersion des systèmes et des passeurs d'échantillons UPLC est faible.
C'est une caractéristique fixée pour chaque instrument, mesurée d'après
l'élargissement des pics, spécifique à chaque système.
La chromatographie à faible granulométrie utilise des colonnes courtes
d'efficacité élevée. Le volume d'une colonne UPLC 2,1 x 50 mm typique est
d'environ 174 μL, à comparer aux 2,5 mL d'une colonne HPLC classique de
4,6 x 150 mm. La taille inférieure des colonnes et des particules nécessite un
système de faible dispersion pour réduire la dilution et l'élargissement de la
bande. Le système permet ainsi de conserver la forme et la taille des pics ainsi
que la sensibilité obtenues sur une colonne d'efficacité élevée.
Un système ACQUITY UPLC H-Class présente en général un étalement des
pics entre 10 et 12 μL. La valeur dépend de la configuration de votre système.
L'étalement des pics d'un système HPLC Alliance peut être compris entre
35 μL et 50 μL. Du fait des différences de dispersion, une bande d'un système
Alliance présente une dilution trois fois plus élevée qu'un système ACQUITY
UPLC H-Class. Il en résulte que les concentrations des pics UPLC sont
supérieures à celles des pics HPLC. Les effets de solubilité sont plus évidents
dans les systèmes à faible dispersion et à haute pression. Il est donc
primordial de régler correctement la charge de la colonne.
Contamination inter-échantillons
Une contamination inter-échantillons se produit dans un système
chromatographique lorsque le pic d'un analyte précédemment injecté apparaît
sur le chromatogramme d'échantillons ultérieurs. La contamination
inter-échantillons se produit généralement lorsqu'une faible quantité
d'analyte reste dans le système après injection. Elle se mesure en observant
les pics d'analyte qui apparaissent lorsque vous lancez une analyse de blanc
immédiatement après un échantillon analytique. La contamination
inter-échantillons mesurée par Waters est inférieure à 0,004 % sur le système
ACQUITY UPLC H-Class. Consultez les Caractéristiques techniques du
système ACQUITY UPLC H-Class pour plus de détails.
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Optimisation des performances