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Section 7 : Utilisation de l'automate de coloration
Problème
Coloration anormale sur toute la surface de
quelques lames, tandis que d'autres lames
du même carrousel semblent normales.
Des stries ou des bandes de décoloration
sur une ou plusieurs lames.
Les cellules glissent des lames.
Les lames sont trop rouges.
Assurez-vous que tous les aimants de position restent
fi xés au fond du carrousel. Assurez-vous que l'automate
de coloration n'a pas été programmé pour un nombre
de lames inférieur à celui des lames chargées.
Si vous programmez l'automate de coloration pour une charge
partielle, chargez les lames en position correcte, comme
indiqué par les repères du carrousel (Cf. Section 4.1).
Vérifi ez que chaque pompe de réactif est amorcée en ouvrant
le couvercle et en appuyant sur le bouton d'amorçage
correspondant. La buse doit immédiatement pulvériser
un fi n brouillard de réactif. Il ne doit exister aucun bruit
de pulvérisation ou de siffl ement indiquant la présence
d'air dans les conduites de réactif (cf. Section 7.3).
Consultez les procédures de préparation des
échantillons et des lames en Annexe E.
Vérifi ez la géométrie du jet de la buse selon les procédures
des Sections 4.1 et 6.6. Ce type de coloration est
généralement causé par des débris ou un précipité de
réactif obstruant l'orifi ce de la buse de pulvérisation.
Nettoyez les buses qui présentent une
mauvaise géométrie de pulvérisation.
N'utilisez pas l'option de prélavage. Utilisez des lames revêtues
(SS-118) de poly-L-lysine.
Consultez les procédures de préparation des échantillons et
des lames en Annexe E.
Contactez ELITechGroup pour obtenir des informations quant à
la qualité des lames.
Un réservoir vide de réactif E (lavage à l'alcool) empêchent le
bon rinçage des lames et laisse des résidus de réactif A (EA-
50) sur la lame. Vérifi ez le niveau de réactif E et si nécessaire,
exécutez le test de géométrie de pulvérisation pour vous
assurer de la bonne distribution de réactif. Cf. Section 6.6.
Contrôlez le tuyau de vidange pour détecter une installation
incorrecte ou une obstruction de la conduite (par exemple
une accumulation de colorant). Cette situation peut causer
une accumulation de réactif de coloration dans la cuve
et au lavage incomplet des lames. Cf. Section 2.1.
Une coloration rouge complète ou prédominante peut également
survenir si le paramètre de coloration cytoplasmique est trop
faible. Étant donné que les molécules de vert rapide du réactif A
(EA-50) sont plus grosses que celles d'éosine Y, elles pénètrent la
membrane cellulaire et se colorent plus lentement, ce qui permet
aux cellules de se colorer en rouge via l'éosine Y. Pour remédier
à ce problème, utilisez un paramètre cytoplasmique plus élevé.
Contrôlez la distribution des buses et la géométrie de
pulvérisation avant la coloration en cas de problème de
coloration. (Cf. Section 6.6). La distribution de réactif inadéquate
constitue la cause principale d'une coloration incorrecte.
Solution
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