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Annexe E : Contexte technique de la coloration de Papanicolaou
D.6 Coloration des frottis
1. Évitez de disperser le frottis sur les côtés de la lame.
2. Recommandez d'utiliser des lames revêtues (SS-118).
3. Fixez les frottis à l'aide d'une des méthodes suivantes :
◊ Pulvériser du fi xatif.
◊ Immergez dans de l'alcool à 95 % de 15 à 30 minutes.
◊ Immergez dans un fi xatif de type Sacammanno de 15 à 30 minutes.
4. Paramètres recommandés :
◊ Nucléaire/Htox : 3, 4, 5, 6
◊ Cytoplasmique/EU : 3, 4, 5, 6
◊ Pas de prélavage
D.7 Méthode d'élimination du carbowax alternative
Les fi xatifs disponibles dans le commerce possèdent une teneur variable de polyéthylène glycol
(carbowax). Le carbowax protège les cellules contre le séchage à l'air avant la fi xation, mais peut inhiber la
coloration s'il n'est pas entièrement éliminé. Étant donné que le réactif d'hématoxyline aqueux employé par
la procédure de coloration d'ELITechGroup est suffi sant pour éliminer le carbowax hautement soluble dans
l'eau dans la plupart des scénarios, les paramètres No Pre-Wash (Pas de prélavage) sont généralement
acceptables. Si le spécimen doit être protégé contre la perte de cellules, la méthode suivante s'avère
parfois préférable à un paramétrage de prélavage plus faible ou plus élevé de l'instrument :
Pour éliminer le carbowax
1. Immergez les lames dans de l'alcool à 95 % ou dans une solution composée à parts égales de glycérol
et d'alcool de 10 à 30 minutes avant coloration.
Ne pas placer de frottis dans la zone située à
moins de 1/16 po (1,6 mm) du bord de la lame
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