Dépannage - Promega A1751 Mode D'emploi

6. Dépannage
Pour toute question qui ne serait pas traitée ci-dessous, veuillez consulter une succursale ou un distributeur
Promega local. Les coordonnées de ceux-ci sont disponibles au site : www.promega.com.
Adresse électronique : techserv@promega.com.
Symptômes
Faible rendement en ADN
ADN dégradé
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EP048 · Révisé 7/17
Causes possibles et commentaires
La résine ReliaPrep™ n'a pas été remise en suspension de façon adéquate
avant l'emploi. Resuspendez la résine ReliaPrep™ avec soin dans le
flacon de réactif avant de la transférer pour la purification des échantillons.
L'échantillon contenait trop peu de leucocytes par millilitre de sang. Le
rendement en ADN dépend du nombre de leucocytes dans le matériel
de départ. Les échantillons avec un faible taux en leucocytes présenteront
un moindre rendement en raison de la quantité réduite au départ.
Le volume initial de l'échantillon dépasse la capacité de traitement du
système. Le ReliaPrep™ Large Volume HT gDNA Isolation System a été
optimisé pour purifier de l'ADN à partir de 1 à 10 ml de sang total. Le
traitement d'échantillons de sang en dehors de cette plage recommandée
peut entraîner une réduction du rendement en ADN et de sa concentration.
Si la limite de 10 ml est dépassée, les volumes de traitement nécessaires
seront en excès du volume utile maximal des tubes de 50 ml. Le ReliaPrep™
Large Volume HT gDNA Isolation System a été optimisé pour des
échantillons de sang normaux provenant d'adultes en bonne santé, qui
contiennent en général entre 4,5 × 10
échantillons de sang total contenant un taux plus élevé de leucocytes
peuvent provoquer une capture plus lente de la résine ReliaPrep™ au
cours de la purification, ce qui réduit le rendement.
L'utilisation réussie du ReliaPrep™ Large Volume HT gDNA Isolation
System dépend de l'usage des réactifs appropriés dans l'ordre voulu.
Vérifiez si tous les réactifs ont bien été placés dans la position adéquate
de l'appareil et s'ils ont été dilués correctement avant l'emploi.
Des nucléases ont été introduites au cours de la purification ou du
maniement. Utilisez des récipients en plastique ou en verre sans nucléases.
Utilisez des cônes à filtre pour toutes les étapes de pipetage. Portez des
gants à tout moment. Les nucléases éventuellement introduites après
l'élution dégradent l'ADN. Pour protéger l'ADN élué contre les nucléases,
sélectionnez l'option d'ajouter du tampon TE concentré à une concentration
de 1X dans l'éluat final.
L'ADN était dégradé avant la procédure de purification. Si l'ADN était
dégradé avant la purification, l'ADN résultant le sera également.
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et 1 × 10 leucocytes/ml. Des
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