7 Dépannage
Description de l'erreur
Motif grillagé sur la membrane
Les molécules ne migrent pas en dehors
du gel
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Mesure corrective
Si des cassettes sont pliées alors qu'elle
sont vides, les remplacer. Un garnissage
excessif des cassettes peut provoquer
leur pliure. Voir
cassette de transfert à la page
Ajouter des feuilles de papier de trans-
fert supplémentaires pour augmenter
l'espace entre le panneau de cassette et
le gel. Veiller à ne pas encombrer la
cassette ; le gel doit être maintenu
fermement et uniformément entre les
éponges, mais ne doit pas être écrasé.
Augmenter la puissance du champ.
Augmenter le temps de transfert
(essayer de le doubler).
Ne pas utiliser de colorant ni de fixateur
sur le gel avant le transfert.
Utiliser un gel plus fin.
Réduire la concentration de gel d'acry-
lamide.
Vérifier que le pH du tampon est proche
du pH voulu. La plupart des tampons ne
doivent pas être titrés ; constituer un
nouveau tampon.
Utiliser 3,5 mM de SDS (0.1 %) dans le
tampon de transfert.
Éviter d'inclure du méthanol dans le
tampon de transfert ou en réduire la
quantité au strict minimum.
Utiliser des produits chimiques de
qualité « réactif ».
Augmenter la durée de dépurination
des transferts de Southern.
Utiliser un autre tampon de transfert
d'un pH différent pour augmenter la
charge nette de la protéine. Un pH plus
faible (< 6 à 7) augmente la charge posi-
tive des protéines ; un pH plus élevé
(> 6 à 7) en augmente la charge néga-
tive.
Réservoir de transfert standard TE62 Operating Instructions 29281927 AB
Assemblage de la
24.