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Remarque :
Assembler la pile de transfert de sorte que les molécules migrent vers la membrane.
Pour les macromolécules chargées négativement (telles que les acides nucléiques et la
plupart des protéines), constituer la pile sur la partie (moitié) grise de la cassette, (puis
positionner la cassette assemblée dans le réservoir de sorte que ce côté soit orienté
vers le panneau gris de l'anode (+), qui se connecte au fil rouge).
Suivre les instructions ci-dessous pour assembler la cassette de transfert.
Étape
1
2
3
4
5
6
7
8
Réservoir de transfert standard TE62 Operating Instructions 29281927 AB
AVIS
Veiller à soigneusement éliminer toutes les bulles d'air à chaque
étape, car la présence de bulles d'air, notamment entre la
membrane et le gel, bloque le transfert.
Porter impérativement des gants lors de la manipulation des
membranes afin d'éviter d'y laisser des empreintes digitales.
Action
Placer une éponge de 3 mm d'épaisseur sur la cassette ouverte et
immergée, et appuyer délicatement jusqu'à ce que tout l'air en soit éliminé.
Placer une feuille de papier de transfert sur l'éponge.
Placer la membrane sur le papier de transfert.
Placer le gel, qui contient un échantillon séparé par électrophorèse et équi-
libré (si nécessaire) avec le tampon de transfert, sur la membrane.
Remarque :
Essayer de placer le gel correctement dès la première tentative, car le trans-
fert des protéines risque de commencer immédiatement. Une fois qu'il a
commencé, tout déplacement du gel faussera les résultats ou provoquera
des « bandes d'ombre » sur le blot.
Faire rouler délicatement une pipette en verre ou un tube à essai sur le gel
pour éliminer tout l'air piégé entre la membrane et le gel.
Couvrir le gel d'une feuille de papier de transfert.
Faire rouler délicatement une pipette en verre ou un tube à essai sur la pile
pour éliminer tout l'air piégé entre le papier de transfert et le gel.
Placer une éponge d'une épaisseur adaptée, puis appuyer délicatement
pour éliminer l'air piégé.
5 Fonctionnement
5.2 Assemblage
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