Table des Matières
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7 Dépannage
Description de l'er-
reur
Près du bord supé-
rieur du gel lorsque la
partie avant du
tampon a atteint le
fond
En haut et en bas du
gel
Résolution de
bande insuffisante
58
Cause
Dégradation
Concentration du gel
Précipitation
Concentration du gel
Conditions d'analyse
Qualité des réactifs
Empilement de
mauvaise qualité
Mesure corrective
Les protéines peuvent être
dégradées par des protéases
endogènes : utiliser des inhibi-
teurs de protéases pendant
l'étape d'isolation.
La taille des pores du gel est trop
petite : diminuer le pourcentage
d'acrylamide du gel de résolution
(ou d'empilement).
Les protéines ont précipité.
Chauffer l'échantillon à une
température inférieure (70 °C,
voire moins) pendant 1 à 2
minutes.
La plage de poids moléculaire de
l'échantillon requiert un gradient
de concentration en acrylamide
pour la plage complète des tailles
des protéines.
Commencer l'électrophorèse dès
que l'échantillon est chargé pour
éviter la diffusion des espèces de
faible poids moléculaire.
Effectuer la séparation en appli-
quant un paramètre de courant
ou de tension inférieur pour
réduire l'échauffement par effet
Joule.
Utiliser uniquement des réactifs
de qualité supérieure.
Utiliser uniquement des gels qui
ont été préparés récemment.
Ajouter un gel d'empilement ou
augmenter la hauteur de ce
dernier. Préparer la surface du gel
de résolution en le rinçant
d'abord avec une solution de
monomère avant de verser le gel
d'empilement, afin de garantir la
continuité entre les gels.
SE 400 Vertical Mode d'emploi 29281782 AB
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