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5 Fonctionnement
5.3 Préparation d'un gel de polyacrylamide en gradient
Étape
6
Versement d'un gel en gradient
linéaire
Suivre les instructions ci-dessous pour verser un gel en gradient linéaire.
Étape
1
2
3
4
5
6
7
8
9
38
Action
Placer le formeur de gradient sur un agitateur magnétique et démarrer l'agi-
tation à une vitesse permettant de mélanger la solution sans y introduire de
bulles.
AVERTISSEMENT
L'acrylamide est une neurotoxine. Toujours porter des gants et
respecter toutes les consignes de sécurité du laboratoire.
Action
Pendant l'agitation de la solution, commencer le pompage depuis la
chambre de mélange et ouvrir le verrou de la chambre du réservoir. Lever la
canule à mesure que le liquide pénètre dans le sandwich en maintenant
l'embout à la surface du gel.
Préparer davantage de gels si nécessaire. Commencer par les étapes de
préparation décrites à la section
Sur chaque gel, déposer une fine couche de butanol saturé en eau, d'eau ou
de tampon de gel dilué pour éviter d'exposer le gel à l'oxygène.
Administrer lentement cette solution à l'aide d'une seringue en verre
équipée d'une aiguille de calibre 22. Appliquer la solution à proximité de l'es-
paceur sur un côté du sandwich et la laisser couler naturellement sur toute
la surface.
Laisser le gel polymériser pendant au moins 1 h.
Après la polymérisation, vider la couche de solution (butanol saturé en eau,
eau ou tampon de gel) et rincer la surface du gel plusieurs fois à l'eau
distillée.
Préparer la solution de monomère de gel d'empilement.
Verser le gel d'empilement.
Introduire un peigne (en l'inclinant légèrement) dans le sandwich en prenant
garde de ne pas enfermer de bulles d'air sous les dents.
Laisser le gel d'empilage polymériser pendant au moins 1 h.
Préparation, à la page
36.
SE 400 Vertical Mode d'emploi 29281782 AB
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