cytiva SE 400 Vertical Mode D'emploi page 37

Étape
3
4
Préparation des solutions
Suivre les instructions ci-dessous pour préparer les solutions pour un gel en gradient.
Étape
1
2
3
4
5
SE 400 Vertical Mode d'emploi 29281782 AB
Action
Fixer une extrémité de la tubulure au port de sortie du formeur de gradient
et l'autre extrémité à une canule de 20 cm.
Remarque :
Le diamètre extérieur de la canule doit être inférieur à l'épaisseur de l'espa-
ceur.
Placer la canule de sorte qu'elle repose au bas du sandwich, à mi-chemin
entre les espaceurs.
AVERTISSEMENT
L'acrylamide est une neurotoxine. Toujours porter des gants et
respecter toutes les consignes de sécurité du laboratoire.
Action
Calculer le volume de solution de monomère requis ; se reporter à
solution, à la page 32. Diviser le volume total en deux ; préparer deux fois ce
même volume de solution d'acrylamide, un à fort pourcentage et l'autre à
faible pourcentage.
Astuce :
Ajuster la solution à fort pourcentage d'acrylamide pour atteindre 15 % (m/v)
de saccharose ou 25 % (v/v) de glycérol afin d'améliorer la superposition des
couches.
Verser la solution à faible pourcentage d'acrylamide dans la chambre du
réservoir.
Ouvrir suffisamment le verrou entre les chambres pour déplacer l'air, puis
fermer.
Verser la solution à fort pourcentage d'acrylamide dans la chambre de
mélange et y placer un barreau d'agitation.
Pour les gels en gradient exponentiel, veiller à placer un plongeur ou un
bouchon de scellage au-dessus du liquide dans la chambre de mélange pour
maintenir un volume constant.
5.3 Préparation d'un gel de polyacrylamide en gradient
5 Fonctionnement
Volume de
37