Préparation Et Chargement D'échantillons - cytiva SE 400 Vertical Mode D'emploi

5 Fonctionnement
5.4 Préparation et chargement d'échantillons
5.4 Préparation et chargement d'échantillons
Introduction
Cette section décrit comment préparer l'échantillon.
La quantité d'échantillon chargé dépend de l'épaisseur du gel, de la sensibilité de la
méthode de détection utilisée et de la quantité d'échantillon attendue dans chaque
bande. Pour un système de tampon continu, les échantillons de protéines doivent être
relativement concentrés, car aucun gel d'empilement n'est utilisé. Pour un système de
tampon discontinu, la zone dans laquelle chaque espèce moléculaire migre est accen-
tuée par le gel d'empilement, aussi les échantillons n'ont pas besoin d'être concentrés.
Volume d'échantillon
Volume d'échantillon pour chaque puits de 1 mm de profondeur.
Épaisseur de gel
Nombre de puits
10
12
15
20
28
Préparation de l'échantillon
Suivre les instructions ci-dessous pour préparer les échantillons.
Étape
1
2
3
4
40
0,75 mm
6,2 µl
5,8 µl
4,3 µl
3,1 µl
2,1 µl
Action
Déterminer le volume d'échantillon pouvant être chargé. Se reporter à
Volume d'échantillon, à la page
Augmenter la densité liquide des échantillons avec 10 % de glycérol ou de
saccharose.
Ajouter un colorant de traçage aux échantillons.
Pour des gels de protéines avec SDS, utiliser un tampon de traitement 2×
pour dénaturer à la fois les échantillons liquides et les échantillons secs dans
un tube à essai.
• Pour liquéfier des solutions de protéines, ajouter un volume équivalent de
tampon 2×.
1,00 mm
8,3 µl
S.O.
5,7 µl
4,1 µl
2,7 µl
40.
SE 400 Vertical Mode d'emploi 29281782 AB
1,5 mm
12,4 µl
11,5 µl
8,6 µl
6,2 µl
4,1 µl