Contraste De Phase - Leica DMLS Mode D'emploi

Les objectifs à immersion sont entourés par un
deuxième anneau (fig. 21) coloré:
noir Huile, ou immersion universelle
(huile, eau, glycérine)
blanc Eau
orange Glyérine
Condenseur à immersion
La plus part du temps, les condenseurs CL/PH
0.90/1.25 OIL et UCL 0.90/1.25 OIL (fig. 7)
s'emploient à sec. Leur ouverture numérique
maximale est alors de 0.90. On peut toutefois
aussi les utiliser avec de l'huile d'immersion
(25.4). Pour ce faire, on verse 1 à 3 gouttes
d'huile sur la lentille frontale et on place le
spécimen en faisant attention de ne pas faire de
bulle. Puis, on fait le réglage de Koehler comme
d'habitude → p. 30. Le médium optique permet
une ouverture allant jusqu'à 1.25, c'est à dire
une nette amélioration de la résolution des
objectifs à ouverture élevée (Ex; 100x/1.25 OIL),
mais seulement en fond clair. Pour retirer l'huile;
voir → p. 46.
On peut aussi employer de la glycérine à la
place de l'huile. Les condenseurs Pol CL P/PH
0.85 et UCL P 0.85 ne s'emploient qu'à sec.
Fond clair
Le procédé d'illumination dans lequel les zones
sans structure du spécimen sont les parties les
plus claires s'appelle le fond clair. Il faut une
structure absorbante, et, dans la plus part des
cas, une coloration de la préparation est
nécessaire. Alternative: les procédés de
contraste optiques CF, FN, POL, etc.
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Sources d'erreurs possibles
Mauvaise épaisseur du couvre-objet (→ p. 22)
ou mauvais objectif. Préparation posée avec le
couvre-objets vers le bas et non vers le haut.
Diaphragme de champ (23.7) trop ouvert ou trop
fermé. Condenseur mal positionné en hauteur
ou mal centré.
Lampe implantée de travers (→ p. 16). Com-
posants optiques sales.

Contraste de phase

Comme le fond noir (→ p. 36), le contraste de
phase sert à donner une image contrastée de
préparations incolores.
Placer un objectif à faible grossissement (10x;
gravure PH, fig. 21) dans le trajet optique et
mettre au point sur la préparation. En cas de
difficulté pour trouver le plan-objet; fermer
provisoirement le diaphragme de champ (23.7)
et utiliser un spécimen coloré; mettre le barillet
de condenseur en position BF (23.8) et retirer les
anneaux de lumière (8.7).
Faire le réglage de Koehler (→ p. 30): tout en
déplaçant le condenseur en x, y et z, faire la
mise au point du diaphragme de champ en
même temps que celle de l'objet.
Utiliser l'anneau de lumière du barillet (23.8) ou
du coulisseau (8.7) (ex: PH 1) correspondant à la
gravure figurant sur l'objectif.