7 Dépannage
Description de l'er-
reur
Prélèvements
d'échantillons
colorés à l'avant du
tampon
Prélèvements
d'échantillons
colorés près du bord
supérieur du gel
lorsque la partie
avant du tampon a
atteint le fond
Prélèvements
d'échantillons
colorés en haut et en
bas du gel
Résolution de bande
insuffisante
60
Cause éventuelle
Concentration du gel
Dégradation
Concentration du gel
Précipitation
Concentration du gel
Conditions d'analyse
Qualité des réactifs
Empilement de
mauvaise qualité
Mesure corrective
La restriction des molécules
selon la taille des pores du gel de
résolution est insuffisante :
augmenter le pourcentage
d'acrylamide du gel.
Les protéines peuvent être
dégradées par des protéases
endogènes : utiliser des inhibi-
teurs de protéases pendant
l'étape d'isolation.
La taille des pores du gel est trop
petite : diminuer le pourcentage
d'acrylamide du gel de résolution
(ou d'empilement).
Les protéines ont précipité.
Chauffer l'échantillon à une
température inférieure (70 °C,
voire moins) pendant 1 à 2
minutes.
La plage de poids moléculaire de
l'échantillon requiert un gradient
de concentration en acrylamide
pour la plage complète des tailles
des protéines.
Commencer l'électrophorèse dès
que l'échantillon est chargé pour
éviter la diffusion des espèces de
faible poids moléculaire.
Effectuer la séparation en appli-
quant un paramètre de courant
ou de tension inférieur pour
réduire l'échauffement par effet
Joule.
Utiliser uniquement des réactifs
de qualité supérieure.
Utiliser uniquement des gels qui
ont été préparés récemment.
SE 600 Ruby Mode d'emploi 29279312 AB