Table des Matières
Publicité
5 Fonctionnement
5.2 Préparation d'un gel de polyacrylamide
Étape
4
5
Préparation du gel d'empilement
pour gels d'électrophorèse 2D
discontinus
Suivre les instructions ci-dessous pour préparer le gel d'empilement pour un gel d'élec-
trophorèse 2D discontinu.
Étape
1
2
3
4
32
Action
Verser le gel d'empilement dans le gel de résolution à l'aide d'une pipette
jetable ou Pasteur, jusqu'à environ 2 mm du bord supérieur de la plaque.
Introduire un peigne (en l'inclinant légèrement) dans chaque sandwich en
prenant garde de ne pas enfermer de bulles d'air sous les dents. Laisser le gel
polymériser pendant au moins 1 h.
AVERTISSEMENT
L'acrylamide est une neurotoxine. Toujours porter des gants et
respecter toutes les consignes de sécurité du laboratoire.
Action
Une fois que le gel de résolution est prêt, préparer la solution de scellage
d'agarose en la dissolvant dans le tampon d'analyse.
Éliminer la couche de solution (butanol saturé en eau, eau ou tampon de gel
dilué) en rinçant le haut du gel plusieurs fois avec de l'eau distillée. Renverser
le dispositif de coulage de gel pour le vider. Pour garantir un contact direct
entre les gels de résolution et d'empilement, éliminer le liquide résiduel en
transférant un coin à l'aide d'une lingette de laboratoire.
Placer la bande IPG (gradient de pH immobilisé) ou le gel en tube par-dessus
le gel de résolution.
Remarque :
Veiller à ne pas enfermer de bulles d'air entre les gels de la première et de la
deuxième dimension.
Verser la solution de scellage d'agarose sur le gel de résolution à l'aide d'une
pipette jetable ou Pasteur.
SE 600 Ruby Mode d'emploi 29279312 AB
Publicité
Table des Matières
