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Consignes relatives à l'analyse de
gels dans un système de tampon
Laemmli
Paramètre
Épaisseur de gel
Courant par gel
Tension de départ
Tension finale
*
Plus un gel est épais, plus il requiert de courant (proportionnellement), et inversement.
Par exemple, un gel de 0,75 mm, soit un gel moitié moins épais qu'un gel de 1,5 mm,
requiert moitié moins de courant, soit 12,5 mA.
†
Le courant doit être multiplié par le nombre de gels. Par exemple, pour deux club sand-
wiches installés, il faut quatre fois plus de courant pour analyser les quatre gels. Il est
possible d'augmenter le courant pour des analyses plus rapides si un refroidissement
actif est utilisé ; il est possible de le réduire pour les analyses plus lentes réalisées
pendant une nuit entière.
‡
À 25 mA par gel.
Enregistrement d'une analyse
Conserver un enregistrement des paramètres de courant ou de tension, du nombre et
de l'épaisseur des gels, du système de tampon, des mesures de courant ou de tension
finales et de départ pour chaque analyse, afin de pouvoir comparer les résultats. Des
résultats incohérents pour un même système avec des paramètres identiques indi-
quent d'éventuels problèmes – par exemple, un courant de fuite, des concentrations de
tampon incorrectes, des concentrations en sels élevées ou une qualité chimique
inégale.
Vérifier la progression des bandes au bout de 5 min, puis de nouveau au bout de 1 h,
tout en gardant un œil sur le taux de migration du colorant de traçage. L'analyse est
terminée lorsque le colorant de traçage atteint le bas du gel. Vérifier le niveau de
tampon et, si nécessaire, en rajouter de sorte que l'électrode supérieure soit
immergée. En cas de plaque ou de joint coupés, il existe un risque de légère fuite du
tampon ou de passage du tampon dans le gel.
SE 600 Ruby Mode d'emploi 29279312 AB
Valeur
*
1,5 mm
†
25 mA (courant constant)
‡
80 à 90 V
220 à 250 V
AVIS
Après une surveillance initiale, ne pas laisser l'unité sans surveil-
lance pendant plus de 1 heure avant de vérifier la progression des
bandes et le niveau de tampon.
5 Fonctionnement
5.6 Analyse d'un échantillon
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