Analysendurchführung - StarLab Phoresis N2007-0810 Manuel D'utilisation

1.1 Bei Verwendung der optional erhältlichen justierbaren Gießplattform ist eine ebene Oberfläche
mit Hilfe der integrierten 3-Punkt Nivellierung sicherzustellen. Setzen Sie dabei den Gelträger mit
der Öffnung nach oben in die Gießschiene ein. Positionieren Sie das mittlere Loch des Gleitarms
der Gießschiene direkt über der darüber befindlichen Öffnung der Plattformbasis und setzen Sie die
mitgelieferte Verschraubung ein. Mit einer Umdrehung um 180° wird der Träger fest angezogen, die
beiden Dichtungen auf jeder Seite des Trägers werden so in die richtige Position gebracht. Ist der Träger
mit seinen Dichtungen richtig eingesetzt, sollte er sich bei seitlicher Berührung nicht verschieben.
2. Setzen Sie das Agarose-Gel gemäß Ihrer individuellen Verfahrensanweisung an.
3. ACHTUNG: Um eine Beschädigung des UV-durchlässigen Gelträgers zu verhindern, achten Sie bitte
darauf, das Gel vor dem Überführen in den Träger bis auf 60°C herunterzukühlen!
Eventuell durch den Gießvorgang entstehende Luftblasen können mit einer kleinen Glaspipette oder
der Ecke eines Kammes entfernt werden. Setzen Sie anschließend vorsichtig die Kämme in die dafür
vorgesehen Kammschlitze ein, um das Auftreten von Luftblasen an der Schnittstelle zu den
Kammzähnen zu verhindern. Sollte die gesamte max. Gellänge für die Separation benötigt werden,
platzieren Sie den Kamm in dem ersten Schlitz des Gelträgers. Für die Separation großer Probemengen
auf einem Gel verwenden Sie bitte mehrere Kammschlitze des Trägers. Kühlen Sie das Gel etwa 30
Minuten ab.
VII. ANALYSENDURCHFÜHRUNG
1. Nach dem Verfestigen der Agarose können Sie vorsichtig das Klebeband vom Gelträger bzw. den
Gelträger von der Gießschiene entfernen. Bei Verwendung des abgedichteten Gelträgers nehmen Sie
vorsichtig den Träger aus der Elektrophoresekammer, drehen ihn um 90° und setzen in zurück in die
Kammer. Entfernen Sie die Kämme langsam, um jegliches Zerreissen der Kavitäten zu verhindern.
ZUR BEACHTUNG: Im Falle der Verwendung konzentrierten Agarosegels kann das Entfernen des
Kammes vom Träger schwierig sein. Im Falle einer starken Anbindung des Gels empfehlen wir die
Überführung des Gelträgers in die Pufferkammer. Füllen Sie anschließend mit Puffer auf, bevor Sie
den Kamm entfernen.
Platzieren Sie den Träger auf der Plattform der Pufferkammer. Vergewissern Sie sich, dass der
Gelträger in richtiger Position angeordnet ist; der erste Kammschlitz ist der schwarzen Elektrode
zugerichtet (Kathode). Zur einfachen Orientierung sind die Bananenstecker farblich codiert.
2. Füllen Sie den Puffer in die Pufferkammer. Der Füllstand des Puffers sollte das Gel mindestens 2-3 mm
bedecken (genaue Hinweise finden Sie auch in Tabelle B „Technische Daten" unter -Max.
Puffervolumen-). Eine einfache Hilfe ist die an der Außenseite der Pufferkammer markierte Fülllinie
(FILL LINE). Zu geringe Puffermengen können zum Austrocknen des Gels im Lauf führen, während
Pufferüberschuss die Wanderung der DNA im Gel verlangsamt.
3. Tragen Sie Ihre Proben auf das Gel auf. Winkeln Sie dabei Ihre Pipettenspitze an und unterlegen die
Flüssigkeit vorsichtig in die Kavität. Achten Sie darauf, die Pipettenspitze nicht auf den Boden der
Kavität zu drücken, um eine Well-to-Well Übertragung der Proben zu verhindern.
4. Schieben Sie den Sicherheitsdeckel über die Elektrophoresekammer. Stellen Sie dabei sicher, dass die
am Deckel fixierten Stromkabel zentriert in die vorgesehenen Bananenstecker der Kammer eingeführt
werden. Bei geöffnetem Deckel wird die Stromversorgung unterbrochen, um eine Gefährdung
während des Analysenvorgangs zu verhindern.
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