Lancement Des Tests - BD Kiestra IdentifA Manuel D'utilisation

Manuel d'utilisation de BD Kiestra™ IdentifA
colonies est répété jusqu'à ce qu'une turbidité de 1,6 unité McFarland soit atteinte, ou jusqu'à
ce qu'il n'y ait plus de substance.
Si la turbidité finale est supérieure ou égale à 0,2 unité McFarland, la suspension est acceptée
pour l'identification MALDI-TOF MS. La cible MALDI est déposée. Si la turbidité finale est
inférieure à 0,2 unité McFarland, une cible est déposée et le système BD Synapsys™
Informatics note que la turbidité de la suspension était faible.
Si une autre suspension doit être préparée pour un isolat différent de la même boîte,
le processus est répété avec un nouvel embout de pipette et une autre cuvette d'isolat.

Lancement des tests

Une fois que toutes les cuvettes du portoir sont remplies ou lorsqu'il n'est plus nécessaire de
créer des suspensions d'isolat, le portoir de cuvettes est transporté dans l'une des positions
suivantes :
en position de dépôt (4) lorsqu'un test MALDI ID est demandé.
l
à la position de remplissage (2) lorsque l'utilisateur a demandé qu'une dilution soit effectuée
l
après que le module a terminé le traitement de l'échantillon. La suspension est diluée.
dans le tiroir du portoir de cuvettes de gauche (1) à des fins de stockage temporaire des
l
portoirs de cuvettes entre les tests.
Une fois tous les tests terminés, le portoir de cuvettes est transporté vers le tiroir du portoir de
cuvettes de droite. Le portoir de cuvettes est éclairé par une lumière verte indiquant qu'il peut
être retiré du tiroir. BD recommande de réaliser un repiquage de chaque cuvette dans le
portoir de cuvettes pour en confirmer la pureté.
Dépôt des cibles MALDI
Une cible MALDI est placée manuellement dans l'un des deux tiroirs de la cible (6, 7).
Lorsque le tiroir est ouvert, le code à barres de la cible est scanné.
Si une suspension d'isolat a été créée avec des colonies de mucoïdes et présente une
turbidité supérieure à 4 unités McFarland, la suspension d'isolat est diluée. Les déchets
liquides sont évacués dans le flacon de déchets liquides (8).
1. Trois (3) microlitres de la suspension d'isolat sont distribués sur un dépôt cible. Si une
distribution échoue après deux tentatives, le spot est ignoré et la cuvette d'isolat est
marquée en échec.
2. Si la turbidité de la suspension d'isolat est inférieure à 1,6 unité McFarland, la distribution
de 3 μl est répétée pour créer des couches supplémentaires de matériel bactérien.
3. Le dépôt est répété pour les suspensions de tous les isolats pour lesquels un test
MALDI ID est demandé. Si le nombre de dépôts disponibles sur une cible n'est pas
suffisant pour repérer toutes les suspensions dans un portoir de cuvettes, le dépôt se
poursuit sur la prochaine cible disponible.
4. Deux (2) microlitres de BTS (13, bouchon jaune) sont distribués sur deux dépôts
supplémentaires pour servir de contrôle (le nombre de dépôts supplémentaires peut être
configuré dans le BD Synapsys™ Informatics).
5. Un microlitre d'acide formique (12, capuchon bleu) est ajouté à chaque spot avec le
matériau de l'échantillon.
6. Un microlitre de solution matricielle (14 et 15, capuchon rouge) est ajouté à chaque dépôt
avec le matériau de l'échantillon et l'acide formique, ou avec le matériau BTS.
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