troisième lentilles se trouve un filtre interférentiel d'une largeur de bande de seulement 6 nm permettant de choisir la
bonne longueur d'onde. Ainsi, les longueurs d'onde à l'origine d'un bruit de fond lors de la mesure sont supprimées de
manière plus efficace. Les pics de transmission pour les filtres installés s'élèvent à 615 nm pour Eu, 645 pour Sm et 545
pour Tb. Le filtre est placé dans un changeur de filtre contrôlé par un moteur pas à pas. Une ouverture est placée juste
devant le tube photomultiplicateur afin d'empêcher toute lumière parasite d'atteindre le tube. Elle contribue également
à réduire le bruit de fond.
Un tube photomultiplicateur à paroi latérale à neuf couches est utilisé pour une construction mécanique compacte.
Le tube photomultiplicateur présente une cathode bi-alcaline à haute température mesurant 8 x 24 mm. Le
refroidissement du tube photomultiplicateur n'est donc pas nécessaire car la cathode présente un faible courant
d'obscurité et une performance stable à température modérément élevée.
Les pulsations de sortie du tube photomultiplicateur sont amplifiées par un préamplificateur puis chargées dans le
prédiviseur via un portail électronique. Une fois la mesure du puits terminée, le microprocesseur lit le contenu du
compteur d'impulsions et sauvegarde les mesures cumulées pour le prochain traitement.
Note : les coordonnées de mesure sont optimisées pour les plaques EFLAB et Nunc. Si vous modifiez le type de plaque
après l'installation, vous devez préciser le type de plaque à utiliser.
Mesure en simple marquage
Lorsque des mesures de marqueur unique sont obtenues dans l'intervalle de temps correspondant au marqueur,
les résultats corrigés finaux (auxquels le blanc et les mesures d'obscurité du photomultiplicateur incluses ont été
soustraits) sont transmis à l'AutoDELFIAWorkstation (voir les graphiques de l'europium et du blanc de la
Courbes de déclin de fluorescence
Mesure en double marquage
Dans le cas d'échantillons à double marquage, la mesure de l'europium est effectuée de la même manière que dans
le cas d'un simple marquage. Il est possible de procéder de cette façon car, comme le montrent
l'intervalle Eu (Eee)
à la page 27,
de blanc et d'obscurité dans l'intervalle Eu
de temps de l'europium est très faible.
Notez que les courbes de
faible
à la page 27,
Figure 23: Mesures de blanc et d'obscurité dans l'intervalle Eu
l'intervalle Sm (Sss)
à la page 28,
blanc et d'obscurité dans les intervalles Sm et Eu
sont bien plus élevées que celles de samarium et de blanc.
Dans le cas du samarium, la situation est plus complexe en raison de la présence significative d'europium dans
l'intervalle du samarium et ce, malgré le filtre du samarium. C'est pourquoi, il nécessaire de recourir à la « calibration
en double marquage ». Le paragraphe suivant décrit le fonctionnement de cette calibration.
Les intervalles prédéfinis pour les mesures en double marquage de Eu et Sm sont :
Intervalles de temps
Eu
Sm
Calibration en double marquage
Dans le cas de la calibration en double marquage, le standard d'europium (E) est mesuré dans les intervalles de
l'europium (e) et du samarium (s) à l'aide du filtre de samarium (voir
28,
Figure 25: Eu dans les intervalles Sm et Eu
les intervalles Sm et Eu
l'intervalle de l'europium, E
après une calibration en double marquage.
R = E
/E
ss
es
Au même moment, la valeur de blanc, B
est également indiquée après la calibration en double marquage.
Manuel de l'appareil AutoDELFIA
Description des fonctions
à la page 24).
Figure 22: Sm dans l'intervelle Eu est très faible
à la page 28, le chevauchement des mesures de samarium dans l'intervalle
Figure 21: Eu dans l'intervalle Eu (Eee)
Figure 25: Eu dans les intervalles Sm et Eu
à la page 29 ne sont pas à la même échelle. Les mesures d'europium
Délai heure μs
400
50
à la page 28 et
à la page 29). Le rapport entre les mesures dans l'intervalle du samarium, E
, est calculé pour obtenir le facteur R de correction du chevauchement Eu-Sm qui apparait
es
, est mesurée dans l'intervalle de l'europium avec le filtre de samarium et elle
es
®
à la page 27 et
à la page 27,
Figure 22: Sm dans l'intervelle Eu est très
à la page 28,
à la page 28 et
Temps d'intégration μs
400
100
Figure 24: Sm dans l'intervalle Sm (Sss)
Figure 26: Mesures de blanc et d'obscurité dans
26
Figure 19:
Figure 21: Eu dans
Figure 23: Mesures
Figure 24: Sm dans
Figure 26: Mesures de
à la page
, et celles de
ss