Table des Matières
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4.6
Mesures FP
4.6.1
Polarisation de fluorescence
4.6.2
Gamme du blanc de la mesure
4.6.3
Paramètres du facteur G
2021-06
Notice d'utilisation pour Infinite 200 PRO n° 30160738
La polarisation de fluorescence (FP, P) est définie par l'équation suivante :
(
I
=
(
P
I
Équation 3 :
où I et I⊥ sont égales à l'intensité d'émission de la lumière polarisée parallèle et
perpendiculaire au plan d'excitation, respectivement. La polarisation est une unité
sans dimension, généralement exprimée en unités mP.
Pour démarrer une mesure FP, la bande de programme doit contenir une Blank
range (Gamme de blanc) de la mesure valide et des paramètres G-Factor
(Facteur G) valides.
La réduction du blanc de la mesure est effectuée automatiquement à chaque
mesure de polarisation de fluorescence ; la valeur moyenne des puits témoins
respectifs est soustraite de chaque valeur d'échantillon (voir 4.6.8).
Dans la boîte de groupe Measurement (Mesure), sélectionnez la Blank range
(Gamme de blanc) en cliquant sur Change (Changer) puis en sélectionnant les
puits remplis de blanc de mesure (échantillon).
L'équation donnée pour le calcul de la polarisation de fluorescence suppose que
la sensibilité du système de détection soit équivalente pour la lumière polarisée
parallèle et perpendiculaire. Ce n'est généralement pas le cas et l'intensité
parallèle ou l'intensité perpendiculaire doit être corrigée par le Facteur G. Le
facteur G compense les différences dans les composants optiques entre la
mesure parallèle et la mesure perpendiculaire.
Le facteur G est le facteur de correction qui peut être déterminé pour la longueur
d'onde du fluorophore en mesurant un échantillon avec une valeur de polarisation
connue. Un calibrage valide de l'instrument permettant d'obtenir un facteur G est
une exigence importante pour chaque mesure de polarisation de fluorescence.
)
−
I
⊥
||
)
+
I
⊥
||
4. Utilisation de l'instrument
version 1.4
67
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