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Optique de fluorescence du haut
Sélection du miroir – Fluorescence du haut (uniquement configurations F de
l'Infinite)
2021-06
Notice d'utilisation pour Infinite 200 PRO n° 30160738
Condenseur
Les optiques de type condenseur concentrent la lumière sur la fente d'entrée du
système optique de fluorescence.
Filtre d'excitation
Les filtres passe-bande de longueur d'onde spécifique servent à sélectionner la
gamme de longueur d'onde concernée à partir du spectre complet de la lumière
d'excitation provenant de la lampe de flash. Les filtres sont installés dans des
porte-filtres amovibles et sont interchangeables.
Surveillance de flash
L'énergie lumineuse des flashes individuels peut varier légèrement. Pour prendre
ces variations en compte, une photodiode au silicium de référence surveille
l'énergie de chaque flash individuel. Les résultats de mesure de fluorescence
sont compensés en conséquence.
La lumière flash pénètre dans le système optique en étant focalisée dans une
fente, puis elle traverse le filtre d'excitation. Selon la longueur d'onde mesurée,
soit un miroir semi-transparent (50 %), soit un miroir dichroïque spécial reflète la
lumière en direction de la microplaque. Le système de lentilles d'objectif
concentre la lumière sur l'échantillon.
L'émission de fluorescence est mesurée par le dessus du puits. La lumière de
fluorescence est collectée par l'objectif, dirigée à travers le miroir approprié, et
focalisée dans la fente de sortie pour la détection.
Système de lentilles d'objectif
L'objectif est conçu pour collecter la lumière fluorescente émise par un puits et il
la concentre dans la fente de sortie vers le système de détection.
Les lentilles d'objectif sont fabriquées en silice fondue. Ce matériau fournit une
transmission élevée des UV et est quasiment exempt d'auto-fluorescence.
La configuration F de l'Infinite est équipée d'un porte-miroir qui loge un miroir à
50 % ainsi qu'un miroir dichroïque 510.
L'avantage du miroir à 50 % est qu'il fonctionne quelle que soit la paire de
longueurs d'onde d'excitation et d'émission. Cependant, 50 % de la lumière
d'excitation est dirigée dans l'échantillon ; par conséquent, 50 % de la lumière
d'émission sortant de l'échantillon sont perdus.
Les miroirs dichroïques dépendent de la longueur d'onde et sont conçus pour
réfléchir quasiment entièrement une certaine gamme de longueurs d'onde. Les
miroirs dichroïques permettent un haut pouvoir réfléchissant de la lumière
d'excitation et une transmission élevée de la lumière d'émission ; ils fournissent
généralement un meilleur rapport signal-bruit par rapport aux miroirs à 50 %.
Disponibles pour des formats de plaque allant jusqu'à 384 puits.
Un miroir dichroïque doit correspondre aux longueurs d'onde
d'excitation et d'émission de fluorescence sélectionnées.
2. Description générale
Note
version 1.4
31
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