4. Utilisation de l'instrument
4.5
Optimisation des mesures de fluorescence
4.5.1
Paramètres de l'instrument
Réglages du gain
Propriétés du PMT
60
Notice d'utilisation pour Infinite 200 PRO
Les résultats de mesure de fluorescence peuvent être optimisés d'une part en
réglant les paramètres de l'instrument, et d'autre part, en sélectionnant le matériel
approprié.
Le système de détection de la fluorescence des configurations de l'Infinite utilise
une conversion analogique/numérique (ADC : Analog Digital Converter,
convertisseur analogique-numérique) du signal du PMT. Le réglage du gain
contrôle l'amplification du PMT lors de la conversion de la lumière de
fluorescence en courant électrique. L'ADC a besoin d'une gamme d'entrée
adaptée du courant du PMT pour d'une part fournir un rapport signal/bruit (S/N)
adéquat, et d'autre part garantir la linéarité. Par conséquent, le gain doit être
réglé pour que les puits de la microplaque dont la concentration est maximale
fournissent les lectures les plus précises possibles. Ensuite, les lectures des puits
de la microplaque dont la concentration est plus faible sont isolées du fond –
aussi loin que le niveau de bruit du fond le permet.
Si OVER (Trop plein) est affecté à un puits concerné, vous pouvez
réduire manuellement le gain, ou sélectionner une option de gain
automatique (voir la notice d'utilisation du logiciel).
Le gain pour l'intensité de fluorescence peut être sélectionné sur une plage de 1
à 255. Les performances du PMT dépendent de la tension d'alimentation. Les
PMT du lecteur Infinite sont spécifiés pour une tension de 300 à 1 250 V. La
relation entre les réglages du gain du lecteur Infinite et la tension d'alimentation
est décrite dans l'Équation 1. Par conséquent, l'utilisation prévue du PMT du
lecteur Infinite est spécifiée pour des réglages du gain de 60 à 255. Des réglages
du gain inférieurs à 60 sont possibles, mais les performances du PMT ne sont
pas spécifiées pour une tension d'alimentation < 300 V. Ainsi, Tecan décline
toute responsabilité pour les résultats de mesure du lecteur Infinite lorsque des
réglages du gain inférieurs à 60 sont utilisés.
Gain
U =
255
Équation 1 :
Où U est la tension, Gain est le réglage du gain sélectionné, 255 est le gain
maximal possible et 1 250 V est la tension d'alimentation maximum du PMT.
Exemple :
Un gain de 100 correspond à une tension d'alimentation de 490 V :
100
=
U
255
Équation 2 :
Note
*
1250
V
=
*
1250
490
V
n° 30160738
version 1.4
2021-06