Chapitre 3 Préparation des réactifs
Introduction
Préparer les réactifs SBS
Préparer les réactifs d'indexage et appariés
Introduction
Avant de configurer l'analyse, préparez tous les réactifs pour le séquençage : réactifs SBS, réactifs
d'indexage et réactifs appariés. Les instructions de préparation des réactifs sont identiques pour toutes les
versions de trousses. Tous les réactifs sont chargés à la demande du logiciel au cours de la configuration de
l'analyse. Il n'est pas nécessaire de revenir à l'instrument pendant l'analyse pour recharger.
Les réactifs de séquençage peuvent être préparés pendant la génération d'amplifiats. Pour des instructions
relatives à la préparation de la Flow Cell et des réactifs d'amplifiats et à la génération d'amplifiats , consultez
le Guide du système cBot 2 (document nº 15065681) ou le Guide du système cBot (document nº 15006165).
Préparer les réactifs SBS
Utilisez les instructions suivantes pour décongeler et inspecter les réactifs SBS : PSM, PIM et PCM. Utilisez
PB1 et PB2 directement à partir du stockage.
Préparez le nombre approprié de flacons de réactifs SBS.
Pour une Flow Cell
Réactif
(Analyse de Flow Cell
unique)
PB1
PB2
PCM
PIM
PSM
Décongeler les réactifs SBS
1
Retirez quatre flacons de chacun des réactifs PSM, PIM et PCM de leur lieu de stockage entre -25 °C et -
15 °C.
2
Décongelez-les à une température comprise entre 2 °C et 8 °C pendant 16 heures environ.
Vous pouvez aussi décongeler les réactifs PSM et PIM dans un bain d'eau désionisée à température
ambiante pendant environ 90 minutes. Décongelez le PCM dans un bain d'eau séparé.
REMARQUE
Remplacez vos gants après avoir manipulé le PCM.
3
Retournez chaque flacon pour en mélanger le contenu.
4
Inspectez le réactif PSM pour vous assurer qu'il n'y a pas trace de tourbillons.
5
Réservez les réactifs PSM et PIM sur la glace.
6
Réservez séparément le réactif PCM sur la glace afin d'éviter la contamination croisée.
Document nº 15050091 v07 FRA Support nº 20023569
Destiné à la recherche uniquement. Ne pas utiliser dans le cadre d'examens diagnostiques.
Pour deux Flow Cells
(Analyse de double
1
3
1
1
1
Flow Cell)
2
6
2
2
2
Pour quatre Flow Cells
(Analyse de deux doubles
Flow Cells)
4
12
4
4
4
12
12
13
12