Table des Matières
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Symptômes
Faible qualité de l'ARN (le rapport A
doit être supérieur à 1,8 et leur rapport A
1,8 et 2,4).
Niveaux élevés d'ADN dans les éluats (les éluats sont
contaminés par de l'ADN, ce qui peut interférer avec les
essais ultérieurs).
Le lysat prétraité est trop visqueux pour la pipette
Promega Corporation · 2800 Woods Hollow Road · Madison, WI · 53711-5399 États-Unis · Numéro vert aux É-U 800-356-9526 · (+1) 608-274-4330 · Fax (+1) 608-277-2516
www.promega.com
Causes possibles et commentaires
/A
des éluats
Le taux de leucocytes de l'échantillon de sang se situait au-dessus de la
260
280
/A
entre
plage de 4 × 10
260
230
Ce kit a été optimisé pour la purification d'ARN à partir d'échantillons
de sang contenant entre 4 × 10
Un volume incorrect de sang total a été utilisé. L'utilisation d'un
volume de sang total supérieur ou inférieur à 2,5 ml peut nuire à la
pureté des éluats.
L'échantillon de sang était trop vieux. Les meilleurs rendements sont
obtenus avec des échantillons de sang frais. Les échantillons stockés à
une température comprise entre 2 °C et 10 °C pendant plus de 3 jours
peuvent être de moins bonne qualité.
L'échantillon a été stocké en dessous de 2 °C ou au-dessus de 10 °C
avant la purification. Un stockage à une température incorrecte peut
provoquer la lyse des leucocytes ou la dégradation de l'ARN.
Une quantité insuffisante de surnageant a été retirée après la lyse diffé-
rentielle. Assurez-vous que le surnageant est éliminé de manière aussi
complète que possible.
Le type d'échantillon était incorrect. Ce kit a été conçu pour être utilisé
avec des échantillons de sang total humain. Les autres types d'échantil-
lons (par ex. moelle osseuse, plasma, couche leucocytaire, etc.) n'ont
pas été testés avec ce kit.
Le taux de leucocytes de l'échantillon de sang se situait au-dessus de la
plage de 4 × 10
Un volume incorrect de sang total a été utilisé. L'utilisation d'un
volume de sang total supérieur à 2,5 ml peut favoriser la contamina-
tion des éluats par de l'ADN.
La DNase I n'a pas été ajoutée à la cartouche. Si possible, examiner le
puits n° 4 des cartouches utilisées. Le puits n° 4 doit être de couleur
verte (et non jaune) si la DNase I a été ajoutée aux cartouches à
l'étape 5 de la Section 6.B.
Le taux de leucocytes de l'échantillon de sang se situait au-dessus de la
plage de 4 × 10
Un volume incorrect de sang total a été utilisé. L'utilisation d'un
volume de sang total supérieur à 2,5 ml peut se traduire par des lysats
visqueux et difficiles à pipeter.
à 10 × 10
leucocytes/ml prévue pour ce produit.
6
6
et 10 × 10
6
6
à 10 × 10
6
leucocytes/ml prévue pour ce produit.
à 10 × 10
leucocytes/ml prévue pour ce produit.
6
6
leucocytes/ml.
6
TM434 · Révisé 8/19
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