Charger Les Consommables Dans La Cartouche - illumina iSeq 100 Manuel Système

Guide du système de séquençage iSeq 100
Ajouter un contrôle PhiX (facultatif)
Le contrôle PhiX est une petite librairie Illumina prête à utiliser comportant une représentation équilibrée des
nucléotides. L'ajout d'une substance de contrôle PhiX à 2 % à la librairie permet d'obtenir des indicateurs
supplémentaires. Une substance de contrôle PhiX à 5 % est recommandée pour des librairies à faible
diversité afin d'accroître la diversité des bases.
REMARQUE
L'ajout d'une substance de contrôle PhiX ayant une concentration aussi faible que 1 % permet d'obtenir
des indicateurs supplémentaires, mais rend le pipetage difficile.
1 Combinez les volumes suivants dans un microtube à faible adhérence pour préparer 50 µl de contrôle
PhiX 1 nM :
contrôle PhiX 10 nM (5 µl);
u
tampon de resuspension (45 µl).
u
2 Agitez brièvement, puis centrifugez à 280 × g pendant une minute.
3 [Facultatif] Conservez le contrôle PhiX 1 nM entre -25 °C et -15 °C pendant un maximum de un mois.
4 Combinez les volumes suivants dans un microtube à faible adhérence pour diluer le contrôle PhiX à la
même concentration de chargement que celle de la librairie, par exemple :
Concentration de chargement du
contrôle PhiX (pM)
50
100
200
5 Combinez le contrôle PhiX et la librairie :
Pour obtenir une substance de contrôle PhiX à 2 %, ajoutez 2 µl de contrôle PhiX dilué à 100 µl de
u
librairie diluée.
Pour obtenir une substance de contrôle PhiX à 5%, ajoutez 5 µl de contrôle PhiX dilué à 100 µl de
u
librairie diluée.
Le pourcentage réel de contrôle PhiX varie en fonction de la qualité de la librairie et de sa quantité.
6 Agitez brièvement, puis centrifugez à 280 × g pendant une minute.
7 Conservez la librairie mélangée à la substance de contrôle PhiX sur de la glace.

Charger les consommables dans la cartouche

1 [Facultatif] Pour visionner une vidéo d'instructions expliquant la préparation et le chargement de la
cartouche, sélectionnez Sequence (Séquencer).
2 Ouvrez le sac contenant la cartouche à partir des encoches.
3 Retirez la cartouche de son emballage en évitant de toucher à la fenêtre d'accès située sur le dessus de
la cartouche.Jetez l'emballage.
4 Retournez la cartouche cinq fois pour mélanger les réactifs.
Les composants internes peuvent cliqueter durant le retournement, ce qui est normal.
5 Tapotez la cartouche (étiquette vers le haut) sur la paillasse ou sur une autre surface dure cinq fois pour
assurer l'aspiration du réactif.
Document nº 1000000036024 v05 FRA
Destiné à la recherche uniquement. Ne pas utiliser à des fins de diagnostic.
Volume de
contrôle PhiX 1 nM (µl)
5
10
20
Volume de la
solution RSB (µl)
95
90
80
25