Préparer La Flow Cell Et Les Librairies - illumina iSeq 100 Manuel Système

Guide du système de séquençage iSeq 100
5 Décongelez la cartouche ensachée en utilisant l'une des méthodes suivantes.Utilisez-là immédiatement
après la décongélation, sans la recongeler ni la stocker.
Méthode
Bain d'eau entre 20 °C
et 25 °C
Au réfrigérateur entre
2 °C et 8 °C
À température
ambiante entre 20 °C et
25 °C
6 Si le bain d'eau provoque de l'humidité, asséchez avec des essuie-tout.
Préparer la Flow Cell et les librairies
Avant le chargement de la Flow Cell et des librairies dans la cartouche, attendez que la Flow Cell soit à
température ambiante, diluez les librairies et ajoutez la substance facultative de contrôle PhiX. Les librairies
sont automatiquement dénaturées sur l'instrument.
Les directives de dilution suivantes s'appliquent aux librairies Illumina prises en charge comportant de l'ADN
double brin. Vous devez toujours effectuer une analyse de contrôle de qualité, optimiser la concentration de
chargement de votre librairie et utiliser une méthode de normalisation qui génère des librairies d'ADN double
brin. La normalisation à base de billes qui génère des librairies d'ADN simple brin n'est pas compatible avec
la dénaturation effectuée sur l'instrument.
Diluer la librairie à 1 nM
1 Préparez la Flow Cell comme suit :
a Sortez une nouvelle Flow Cell du lieu de stockage réfrigéré à une température maintenue entre 2 °C
et 8 °C.
b Laissez l'emballage non ouvert à température ambiante pendant une période de 10 à 15 minutes
pour prévenir la condensation.
La préparation immédiate de la Flow Cell permet de s'assurer qu'elle atteigne la température ambiante
au bon moment.
2 Retirez le tampon de resuspension (solution RSB) du lieu de stockage maintenu entre -25 °C et -15 °C.
Vous pouvez aussi utiliser du Tris-HCl 10 mM, pH 8,5 au lieu de la solution RSB.
3 [Facultatif] Retirez le contrôle PhiX 10 nM du lieu de stockage maintenu entre -25 °C et -15 °C.
Le contrôle PhiX n'est requis que pour l'ajout facultatif d'une substance de contrôle ou pour une analyse
comprenant uniquement le contrôle PhiX.
4 Décongelez la solution RSB et le contrôle PhiX facultatif à température ambiante pendant 10 minutes.
Document nº 1000000036024 v05 FRA
Destiné à la recherche uniquement. Ne pas utiliser à des fins de diagnostic.
Temps de
Directives
décongélation
6 heures, ne dépassez • Utilisez 6 litres (1,5 gallon) d'eau par cartouche.
• Réglez le contrôleur de température du bain d'eau à 25 °C
pas 18 heures
• Submergez la cartouche en orientant l'étiquette face vers le
• N'empilez pas les cartouches dans le bain d'eau, à moins
36 heures, ne Positionnez la cartouche en orientant l'étiquette face vers le
dépassez pas haut pour permettre une libre circulation de l'air sur les côtés
72 heures et sous la cartouche.
9 heures, ne dépassez Positionnez la cartouche en orientant l'étiquette face vers le
pas 18 heures haut pour permettre une libre circulation de l'air sur les côtés
et sous la cartouche.
ou mélangez de l'eau chaude et de l'eau froide pour
atteindre une température entre 20 °C et 25 °C.
haut et en déposant sur la cartouche un poids d'environ
2 kg (4,5 lb) pour éviter qu'elle ne flotte.
que la température ne soit contrôlée.
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