Nettoyage de votre colonne/Allongement de la durée de vie de
votre colonne : colonnes HILIC
Les échantillons doivent être filtrés avant d'être injectés dans la colonne. Ceci
est particulièrement important pour la colonne ZORBAX RRHD HILIC Plus, car
son fritté d'entrée a un diamètre nominal de 0,5 µm et les échantillons doivent
être filtrés à travers un filtre pour échantillon de 0,2 µm. Si le débit du solvant
semble limité (contrepression inhabituellement élevée), commencez par vérifier
l'absence d'obstruction dans le circuit du solvant jusqu'à l'injecteur de la
colonne. Si le problème se trouve avant la colonne, remplacez le tube ou le
filtre qui est bouché. Si la colonne InfinityLab Poroshell 120 HILIC est bouchée,
elle peut être rincée en sens inverse avec 20 à 30 volumes de colonne de
phase mobile. Les colonnes HILIC RRHD ne peuvent pas être rétrobalayées.
Pour retirer les substances fortement retenues sur la colonne, rincez la colonne
à l'aide d'un solvant fort ; de l'eau en mode HILIC.
Les colonnes InfinityLab Poroshell HILIC-OH5 peuvent être régénérées par
rinçage avec un mélange acétonitrile:acétate d'ammonium 50 mM 50:50 à
faible débit pendant au moins 3 heures. Puis stabilisez avec la phase mobile.
Les colonnes InfinityLab Poroshell HILIC-Z peuvent être régénérées par
rinçage avec un mélange acétonitrile:acétate d'ammonium 10 mM 50:50 à
20 % des débits de fonctionnement habituels pendant au moins 3 heures.
Puis stabilisez avec la phase mobile.
Recommandations de stockage : colonnes HILIC
Le solvant recommandé pour un stockage à long terme des colonnes
HILIC est l'acétonitrile:eau 90:10. Avant de procéder au stockage, fermez
hermétiquement les raccords aux extrémités de la colonne avec des bouchons
d'extrémité pour prévenir le dessèchement du remplissage. Les colonnes
peuvent être stockées sans risque dans la plupart des phases mobiles HILIC
pendant de courtes durées. Toutefois, pour protéger votre matériel, il est
préférable d'éliminer les sels de l'instrument et de la colonne en purgeant
celle-ci avec la même phase mobile sans tampon (par exemple, en utilisant
un mélange ACN:H
0 90:10 pour retirer une phase mobile tamponnée
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d'ACN:formiate à 0,01 M 90:10). Cette approche permet une restabilisation
plus rapide avec la phase mobile d'origine, mais plusieurs injections (3 à 6)
doivent être réalisées pour vérifier la stabilisation de la colonne.